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实时荧光定量PCR检测猫嗜血支原体的引物探针组合、试剂盒及方法 

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申请/专利权人:深圳市刚竹医疗科技有限公司

摘要:本发明提供一种实时荧光定量PCR检测猫嗜血支原体的引物探针组合、试剂盒及方法。所述引物探针组合包括的核苷酸序列如SEQIDNO:1‑12所示,本发明提供的试剂盒及检测方法,能够准确检测猫嗜血支原体CMhm、Mhf和CMt三种基因型,从而在猫嗜血支原体早期感染时实现对猫嗜血支原体分型的检测和定量。

主权项:1.一种实时荧光定量PCR检测猫嗜血支原体的引物探针组合,其特征在于,所述猫嗜血支原体包括CMhm型、Mhf型和CMt型,所述引物探针组合包括CMhm型引物探针组合、Mhf型引物探针组合、CMt型引物探针组合和RPS7内参基因引物探针组合,其中:所述CMhm型引物探针组合包括CMhm型正向引物、CMhm型反向引物和CMhm型探针,所述CMhm型正向引物、CMhm型反向引物和CMhm型探针的核苷酸序列如下:CMhm型正向引物:5’-AGTTGTTTGTGATAGATATCG-3’,如SEQIDNO:1所示;CMhm型反向引物:5’-TTGGTTCCTCAATATATCTACG-3’,如SEQIDNO:2所示;CMhm型探针:5’-CTGGAATTCAATGTGTAGCGGTGG-3’,如SEQIDNO:3所示;所述Mhf型引物探针组合包括Mhf型正向引物、Mhf型反向引物和Mhf型探针,所述Mhf型正向引物、Mhf型反向引物和Mhf型探针的核苷酸序列如下:Mhf型正向引物:5’-GGAATTGTCAGCCAAGCTG-3’,如SEQIDNO:4所示;Mhf型反向引物:5’-TGGTGGAAGTGAGGGGAC-3’,如SEQIDNO:5所示;Mhf型探针:5’-CGAACCCCCATCCAATTGACCAG-3’,如SEQIDNO:6所示;所述CMt型引物探针组合包括CMt型正向引物、CMt型反向引物和CMt型探针,所述CMt型正向引物、CMt型反向引物和CMt型探针的核苷酸序列如下:CMt型正向引物:5’-AGAGGCGAAGGCGAAAACT-3’,如SEQIDNO:7所示;CMt型反向引物:5’-CTACAACGCCGAAACACAAA-3’,如SEQIDNO:8所示;CMt型探针:5’-TACCCCAGTAGTCCACACCGTAAACG-3’,如SEQIDNO:9所示;所述RPS7内参基因引物探针组合包括RPS7内参基因正向引物、RPS7内参基因反向引物和RPS7内参基因探针,所述RPS7内参基因正向引物、RPS7内参基因反向引物和RPS7内参基因探针的核苷酸序列如下:RPS7内参基因正向引物:5’-GTCCCAGAAGCCGCACTT-3’,如SEQIDNO:10所示;RPS7内参基因反向引物:5’-CTCTTGCCCACAATCTCG-3’,如SEQIDNO:11所示;RPS7内参基因探针:5’-CCGTGCACGACGCGATCCTGG-3’,如SEQIDNO:12所示;所述CMhm型探针、Mhf型探针、CMt型探针和RPS7内参基因探针的5’端均标记有荧光报告基团,所述荧光报告基团选自FAM、VIC、CY5或ROX中的任意一种,所述CMhm型探针、Mhf型探针、CMt型探针和RPS7内参基因探针的3’端均标记有荧光淬灭基团,所述荧光淬灭基团选自BHQ1、BHQ2、BHQ3或MGB中任意一种。

全文数据:

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