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一种氧化应激报告基因细胞株及其构建方法和应用 

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申请/专利权人:南京医科大学

摘要:本发明公开了一种氧化应激报告基因细胞株及其构建方法和应用。本发明基于PiggyBac转座子的方法构建了活性氧ROS和核因子‑红细胞相关因子2NRF2的双相荧光检测系统。发现报告基因细胞株接受化学物处理刺激后能够发生明显的荧光变化。本发明利用新型转座子载体质粒,可在永生化细胞系中实现氧化应激报告基因细胞株的快速构建,从而高效地筛选出具有潜在氧化应激毒性的化学物。本方法操作简便、检测快速、灵敏度高、稳定性强,可为化学物的氧化应激效应评估提供实用工具。

主权项:1.一种PiggyBac氧化应激质粒,其特征在于所述的PiggyBac氧化应激质粒是在PiggyBacDualPromoter转座子载体中通过同源重组方式插入包含pausesite-minipro-mCherry-T2A-Rluc和EF1a-HyPer7的报告基因所得;其中pausesite-minipro-mCherry-T2A-Rluc核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,EF1a-HyPer7核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。

全文数据:

权利要求:

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