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申请/专利权人:广东医科大学
摘要:本发明具体涉及一种抗NGALIgY抗体及其制备方法和在NGAL临床检测中的应用,所述制备方法包括对蛋鸡进行免疫,用水稀释免疫后蛋鸡分离的蛋黄脂蛋白,并通过硫酸铵沉淀法进行抗体粗纯化,然后对粗纯化的抗体采用G25脱盐柱进行抗体除盐;将NGAL蛋白作为抗原偶联在溴化氢活化琼脂糖凝胶上制成抗原亲和柱,再通过抗原亲和柱对除盐后的抗体进行洗脱纯化、透析和浓缩即得到特异性和亲和力高的抗NGALIgY抗体。再者,通过将抗NGALIgY抗体偶联标记到乳胶微球上,制成免疫比浊试剂,能够在临床上检测人外周血清中NGAL的蛋白含量,并且该试剂的检测快速高效且灵敏度高。
主权项:1.一种抗NGALIgY抗体的制备方法,其特征在于:包括如下制备步骤:1使用NGAL蛋白作为抗原免疫对蛋鸡实施免疫计划,然后分离蛋鸡血清进行抗体效价的监测,待血清抗体效价平稳后,对蛋鸡进行维持免疫;2收集步骤1免疫后蛋鸡所产鸡蛋,用水稀释法分离蛋黄脂蛋白,再通过硫酸铵沉淀法进行抗体粗纯化,得到IgY抗体粗品。3将步骤2所得IgY抗体粗品采用G25脱盐柱进行抗体除盐;4将NGAL蛋白作为抗原偶联在溴化氢活化琼脂糖凝胶上制成抗原亲和柱,并将步骤3除盐后的IgY抗体粗品注入抗原亲和柱中进行洗脱纯化,再经透析和浓缩后得到抗NGALIgY多克隆抗体。
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百度查询: 广东医科大学 一种抗NGAL IgY抗体及其制备方法和在NGAL临床检测中的应用
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