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申请/专利权人：青岛科技大学

摘要：本发明公开了一种基于AgInS2量子点‑DNA纳米线的光致电化学生物传感器及检测Hg2+和黄曲霉素B1的分析应用。本发明的技术方案是利用AgInS2量子点标记DNA纳米线放大信号，结合AgInS2量子点反转NPC‑ZnO纳米多面体的光电流信号，研制了光致电化学生物传感器，通过光电信号“on‑off”检测模式，实现了对Hg2+和黄曲霉素B1双目标高灵敏检测。该发明中AgInS2QDs‑DNA纳米线为研制光电生物传感器检测多种目标开发了新的信号放大技术，提高了检测灵敏度；同时，AgInS2QDs反转NPC‑ZnO光电流信号，极大提高了检测准确度，降低了假阳性，在生物检测和实际应用中具有很高的潜力。

主权项：1.一种基于DNA-量子点纳米线的光致电化学生物传感器在检测Hg2+和黄曲霉素B1中的应用，其特征是：利用AgInS2量子点标记的DNA纳米线放大信号，结合AgInS2量子点反转NPC-ZnO纳米多面体的光电流信号，研制了光致电化学生物传感器，通过光电信号“on-off”检测模式，实现了对Hg2+和黄曲霉素B1双目标高灵敏检测；目标一Hg2+引发了DNA循环放大反应，产生大量RDNA，将AgInS2量子点标记的DNA纳米线组装到电极上，实现了光电化学信号“on”检测Hg2+；进一步利用目标二黄曲霉素B1竞争结合电极表面的适体，使AgInS2量子点标记的DNA纳米线从电极表面脱落，实现了光电化学信号“off”检测黄曲霉素B1；具体如下：步骤1.AgInS2量子点-DNA纳米线的制备：取50μL1μMDNA1和50μL1μMDNA2加入到离心管中，在95℃下加热5min，自然冷却到室温，得到DNA1与DNA2的杂交产物；取70μL纯化的AgInS2量子点，向其中加入15μL含有0.1M的EDC和0.025MNHS的混合溶液，活化羧基40min，再向其中加入15μL10μM的DNA3，将混合溶液放进37℃的摇床里反应6h，得到AgInS2量子点-DNA3混合物，于3000rpm下重新离心5min，之后分散在100μL水里；然后将DNA1和DNA2的杂交产物加入到AgInS2量子点-DNA3的混合溶液中，孵育2h，于2000rpm下重新离心5min，分散在200μL水中，得到AgInS2量子点-DNA纳米线；步骤2.目标Hg2+诱导扩增过程：在含有20mMTris-HCl、100mMNaCl、1mMEDTA和5mMMgCl2的40μLTris-HCl缓冲液中加入30μL5μM发夹DNAHP、6U的ExoⅢ和30μL的不同浓度的Hg2+溶液，将混合物于37℃反应150min得扩增产物RDNA；然后将溶液加热到80℃，时间10min，然后冷却到室温；最后，将RDNA保存在4℃中，以备进一步使用；步骤3.光致电生物传感器的制备及目标检测：取20μL0.5mg·mL-1的氨基化NPC-ZnO滴到ITO电极上，自然干燥后，将活化好的20μLAFB1适体滴到电极上，孵育2h，接着用2mM巯基己醇封闭修饰电极1h；随后向电极上滴加不同浓度的RDNA，孵育2h后再滴加20μLAgInS2量子点-DNA纳米线，反应2h，构建检测Hg2+的光电生物传感平台；表1DNA序列 上述检测Hg2+步骤完成后，再于电极上滴加不同浓度的黄曲霉素B1，孵育2h后，用PBS缓冲液轻微冲洗并在空气中干燥，构建检测黄曲霉素B1的光电传感平台；在含有10mM抗坏血酸的pH7.4、100mMPBS中进行光电流测量，蓝光作激发光源，ITO作为工作电极，Pt丝作为对电极，AgAgCl电极作为参比电极。

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百度查询： 青岛科技大学 一种基于AgInS₂量子点-DNA纳米线的光致电化学生物传感器及其检测应用