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利用滚环扩增(RCA)辅助的颜色组合和序贯荧光原位杂交(CCS-FISH)的多重蛋白和核酸检测方法 

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申请/专利权人:香港科技大学

摘要:本申请涉及蛋白检测方法和微RNA检测方法,提供了使用与寡核苷酸缀合的抗体捕获靶蛋白并分析该蛋白的材料和方法。本申请还提供了使用滚环扩增RCA以扩增寡核苷酸的方法。寡核苷酸包括多个探针结合位点,这使得能够通过颜色组合和序贯荧光原位杂交ccs‑FISH实现多重性。

主权项:1.一种蛋白检测方法,所述方法包括:a提供线性DNA锁式探针,所述线性DNA锁式探针与缀合至抗体的寡核苷酸引物序列发生退火,或者提供环状DNA探针,所述环状DNA探针与缀合至抗体的寡核苷酸引物序列发生退火,其中所述线性DNA锁式探针包括2个至30个荧光原位杂交FISH探针结合位点和2个靶识别位点,并且其中所述环状DNA探针包括2个至30个荧光原位杂交FISH探针结合位点和1个靶识别位点;b提供包含靶蛋白的样品;c使缀合至所述抗体的所述寡核苷酸引物与所述靶蛋白接触,其中所述靶蛋白和所述抗体结合在一起;d使与所述寡核苷酸引物序列发生退火的所述线性DNA锁式探针环化;e扩增环化的DNA锁式探针或所述环状DNA探针,以产生单链线性DNA;以及f使第一FISH探针和第二FISH探针与所述单链线性DNA接触,并且检测所述第一FISH探针和所述第二FISH探针。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 香港科技大学 利用滚环扩增(RCA)辅助的颜色组合和序贯荧光原位杂交(CCS-FISH)的多重蛋白和核酸检测方法

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