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一种过继转移寻常型天疱疮动物模型的方法 

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申请/专利权人:中国医学科学院皮肤病医院(中国医学科学院皮肤病研究所)

摘要:本发明公开了一种构建过继转移寻常型天疱疮动物模型的方法,该方法使用TLR激动剂活化供体细胞,疫苗抗原为桥粒黏蛋白3,免疫佐剂为TLR激动剂。在初次免疫加强免疫后,提取Dsg3––小鼠淋巴细胞作为供体细胞,过继转移至Rag2––小鼠,在第14天Rag2––小鼠开始表现出与寻常型天疱疮相似的表型,包括体重减轻、多处皮肤水疱、表皮脱落、溃烂、口腔和消化道黏膜水疱、血清中出现自身抗体等症状,同时还观察到组织学检查中的表皮棘层松解和抗体沉积等寻常型天疱疮样改变。本方法降低了免疫反应诱导过程中调节性T细胞的比例,减少了供体细胞的用量,因此更适合用于大规模筛选和评估天疱疮药物治疗效果。这为寻常型天疱疮的新型疗法提供了重要的研究工具。

主权项:1.一种过继转移寻常型天疱疮动物模型的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)制备疫苗,将重组桥粒黏蛋白3与免疫佐剂混合,使其成为以重组桥粒黏蛋白3为抗原的疫苗;所述免疫佐剂为MPLA或polyI:C和CpG1826的混合物;当免疫佐剂为MPLA时,按照重组桥粒黏蛋白30.5-50μg、MPLA0.5-50μg的比例配置重组蛋白疫苗,每次给小鼠注射的剂量为重组桥粒黏蛋白30.5-50μg,MPLA0.5-50μg;当polyI:C和CpG1826的混合物作为免疫佐剂时,疫苗的配置比例为重组桥粒黏蛋白30.5-50μg、polyI:C2-300μg、和CpG18260.2-30μg,每次给小鼠注射的剂量为重组桥粒黏蛋白30.5-50μg,polyI:C2-300μg、CpG18260.2-30μg;(2)将(1)中制备的疫苗接种到Dsg3––小鼠,分别进行初次免疫和加强免疫,初次免疫为连续接种1-3天疫苗,加强免疫为在接种第14-49天后,再次连续接种1-3天疫苗;(3)在初次免疫后的28天~63天后,提取淋巴细胞,并将其过继转移至Rag2––小鼠,供体细胞的数量为5×106;(4)过继转移后的14天-21天内,观察疾病表型的出现。

全文数据:

权利要求:

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