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申请/专利权人：中国农业科学院蜜蜂研究所;贵州省现代农业发展研究所

摘要：本发明涉及蜂蜜检测技术领域，具体涉及一种贵州蓝莓蜜的产地溯源和鉴别方法。本发明提供的方法包括：建立贵州蓝莓蜜的产地植物背景数据库，将贵州蓝莓蜜中不同种类的植物花粉分离，将各植物花粉提取DNA后分别进行DNA条形码扩增，将获得的DNA条形码序列在产地植物背景数据库中比对，确定贵州蓝莓蜜的蜜源植物种类，并计算各蜜源植物花粉的DNA条形码扩增产物在所有蜜源植物花粉DNA条形码扩增产物中的含量百分比；将蓝莓作为主要蜜源植物，针对其DNA条形码序列设计特异性引物和探针，确定贵州蓝莓蜜中蓝莓花粉的DNA含量阈值，根据阈值鉴别待测蜂蜜或检测待测蜂蜜的真实性、成熟度。

主权项：1.一种贵州蓝莓蜜的产地溯源和鉴别方法，其特征在于，包括：建立贵州蓝莓蜜产地植物背景数据库；将贵州蓝莓蜜中不同种类的植物花粉分离，将各植物花粉提取DNA后分别进行DNA条形码扩增，将获得的DNA条形码序列在所述产地植物背景数据库中比对，确定贵州蓝莓蜜的蜜源植物种类，并计算各蜜源植物花粉的DNA条形码扩增产物在所有蜜源植物花粉DNA条形码扩增产物中的含量百分比；将蓝莓作为主要蜜源植物，针对蓝莓花粉的DNA条形码序列设计特异性引物和探针，利用所述特异性引物和探针进行PCR扩增，确定贵州蓝莓蜜中蓝莓花粉的DNA含量阈值，根据所述阈值鉴别待测蜂蜜或检测待测蜂蜜的真实性、成熟度；其中，贵州蓝莓蜜中不同种类的植物花粉分离包括：将贵州蓝莓蜜与水混合后，根据不同花粉的沉降速率不同将混合花粉进行分离，再经显微镜观察，分离获得单一种类的花粉；所述DNA条形码序列为叶绿体trnL基因片段；所述特异性引物的序列如SEQIDNO.3-4所示，所述探针的序列如SEQIDNO.5所示；根据所述阈值鉴别待测蜂蜜或检测待测蜂蜜的真实性、成熟度的方法包括：以待测蜂蜜的DNA为模板，利用所述特异性引物和探针进行荧光定量PCR，若荧光定量PCR的Ct值不高于所述阈值，则判断所述待测蜂蜜为贵州蓝莓蜜，若荧光定量PCR的Ct值高于所述阈值，则判断所述待测蜂蜜为非贵州蓝莓蜜或贵州蓝莓蜜的掺假蜂蜜。

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