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申请/专利权人：上海百英生物科技股份有限公司

摘要：本发明属于抗体制备技术领域，具体涉及一种抗NKG2D纳米抗体及其制备方法与应用。本发明方法如下：构建表达NKG2D蛋白，对羊驼进行免疫，获得免疫羊驼PBMC细胞，提取PBMC细胞的RNA，反转录成cDNA，通过PCR获得抗体基因片段，构建到噬菌体表达载体上；将获得的带有抗体基因片段的载体，电转化至SS320电转感受态中，获得NKG2D免疫抗体文库，通过2轮NKG2D蛋白淘选，经过CloneELISA检测，获得与NKG2D蛋白结合的抗体，测序分析后，挑选unique序列，通过哺乳动物细胞高通量表达系统进行高通量表达，获得抗体蛋白，用NKG2D高表达细胞系进行FACS检测，最终获得与NKG2D结合的抗体。本发明的方法操作简单，快速；且哺乳动物细胞表达系统诱导抗体高效表达，翻译后可进行加工修饰，其活性更接近于天然抗体。

主权项：1.一种抗NKG2D纳米抗体，其特征在于，所述抗NKG2D纳米抗体包括框架区和互补决定区；所述互补决定区包括CDR1、CDR2、CDR3，其中所述互补决定区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列选自下列任意一组：1所述互补决定区CDR1序列如SEQIDNO.1所示，所述互补决定区CDR2序列如SEQIDNO.2所示，所述互补决定区CDR3序列如SEQIDNO.3所示；2所述互补决定区CDR1序列如SEQIDNO.1所示，所述互补决定区CDR2序列如SEQIDNO.4所示，所述互补决定区CDR3序列如SEQIDNO.3所示；3所述互补决定区CDR1序列如SEQIDNO.5所示，所述互补决定区CDR2序列如SEQIDNO.6所示，所述互补决定区CDR3序列如SEQIDNO.7所示；4所述互补决定区CDR1序列如SEQIDNO.8所示，所述互补决定区CDR2序列如SEQIDNO.9所示，所述互补决定区CDR3序列如SEQIDNO.10所示；5所述互补决定区CDR1序列如SEQIDNO.11所示，所述互补决定区CDR2序列如SEQIDNO.12所示，所述互补决定区CDR3序列如SEQIDNO.13所示。6所述互补决定区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别与1-5所述任意一组互补决定区CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列至少90％相同。

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权利要求：

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