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一种条件复制型HIV弱毒株及其制备方法和应用 

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申请/专利权人:苏州药明检测检验有限责任公司

摘要:本发明公开了一种条件复制型HIV弱毒株及其制备方法和应用。所述制备方法包括:以HIV病毒基因组骨架为基础,对HIV病毒的致病性辅助基因进行缺失突变,对HIV病毒的转录启动元件进行功能失活,将突变后的辅助基因、功能失活的转录启动元件和调控系统引入到pUC质粒中,得到所述条件复制型HIV弱毒株质粒。本发明的条件复制型弱毒株致病性显著降低,并且需要诱导剂的存在才能在宿主细胞复制增殖,且诱导剂剂量有浓度要求,显著降低了实验人员操作的风险,无需对病毒添加荧光蛋白标签也可识别细胞感染,能够满足行业法规要求的检测要求。

主权项:1.一种条件复制型HIV弱毒株质粒的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:以HIV病毒基因组骨架为基础,对HIV病毒的致病性辅助基因进行缺失突变,对HIV病毒的转录启动元件进行功能失活,将突变后的辅助基因、功能失活的转录启动元件和调控系统引入到pUC质粒中得到所述条件复制型HIV弱毒株质粒;所述辅助基因包括:Vif基因、Vpr基因、Vpu基因和Nef基因;所述Vif基因缺失突变后的核酸序列如序列SEQIDNO.1所示;所述Vpr基因缺失突变后的核酸序列如序列SEQIDNO.2所示;所述Vpu基因缺失突变后的核酸序列如序列SEQIDNO.3所示;所述Nef基因缺失突变后的核酸序列如序列SEQIDNO.4所示。

全文数据:

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