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一种提高纳米孔检测性能的方法 

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申请/专利权人:四川大学华西医院

摘要:本发明涉及纳米孔检测领域,具体涉及一种提高纳米孔检测性能的方法,所述方法包括以下步骤:S101获得第一混合物;S102获得第二混合物;S103获得PaMscS纳米孔‑十二烷基二甲基氧化胺复合物;S104将所述PaMscS纳米孔‑十二烷基二甲基氧化胺复合物嵌入绝缘膜,以形成用于检测带正电荷氨基酸的纳米孔系统;S105将待测样本加入到第一介质;S106向所述第一介质和所述第二介质施加驱动力;S107分析所述电信号,进而实现所述PaMscS纳米孔对所述单分子水平的带正电荷氨基酸的检测。本发明提供的方法能够实现对结构相似的带正电荷氨基酸(例如赖氨酸和精氨酸)的准确区分。

主权项:1.一种提高纳米孔检测性能的方法,其特征在于,所述方法包括利用十二烷基二甲基氧化胺修饰PaMscS纳米孔蛋白,以提高所述PaMscS纳米孔蛋白在检测单分子水平的带正电荷氨基酸的性能,所述PaMscS纳米孔蛋白在所述修饰前不具备直接检测所述单分子水平的带正电荷氨基酸的性能,所述方法包括以下步骤:S101将从宿主细胞释放的PaMscS纳米孔蛋白与十二烷基二甲基氧化胺溶液混合,获得第一混合物;所述十二烷基二甲基氧化胺溶液的浓度包括1-2wv%;S102将所述第一混合物用第一缓冲液洗涤后,利用第二缓冲液进行洗脱,获得第二混合物;其中所述第一缓冲液和所述第二缓冲液包括0.02-0.05wv%的十二烷基二甲基氧化胺;S103将所述第二混合物通过尺寸排阻色谱纯化,获得PaMscS纳米孔-十二烷基二甲基氧化胺复合物;S104将所述PaMscS纳米孔-十二烷基二甲基氧化胺复合物嵌入绝缘膜,以形成用于检测带正电荷氨基酸的纳米孔系统,所述纳米孔系统包括:PaMscS纳米孔-十二烷基二甲基氧化胺复合物、绝缘膜、第一介质和第二介质,所述绝缘膜将所述第一介质与所述第二介质分隔开,所述PaMscS纳米孔-十二烷基二甲基氧化胺复合物提供连通所述第一介质和所述第二介质的通道;所述第一介质和所述第二介质包括电解质溶液,所述第一介质和所述第二介质的pH呈8.0-8.5;S105将待测样本加入到所述第一介质;S106向所述第一介质和所述第二介质施加驱动力,所述待测样本中的所述带正电荷氨基酸与所述PaMscS纳米孔-十二烷基二甲基氧化胺复合物相互作用并产生电信号;S107分析所述电信号,进而实现所述PaMscS纳米孔蛋白对所述单分子水平的带正电荷氨基酸的检测。

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