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申请/专利权人：上海盟德生物科技有限公司

摘要：本发明提供一种将外源性物质导入细胞的装置和方法。本发明第一方面提供一种将外源性物质导入细胞的装置，包括反应模块和控制模块；所述反应模块包括第一存放单元、第二存放单元和电极，所述第一存放单元包括设置有若干个贯通孔的基底，所述基底用于放置细胞，所述第二存放单元与所述贯通孔连通，用于放置所述外源性物质，所述电极分别与所述第一存放单元和第二存放单元连接；所述控制模块与所述电极连接，用于控制所述电极产生脉冲信号。本发明提供的装置有利于提高细胞的存活率及外源性物质的导入效率。

主权项：1.一种将外源性物质导入细胞的方法，其特征在于，使用一种将外源性物质导入细胞的装置进行，所述装置包括反应模块和控制模块；所述反应模块包括第一存放单元、第二存放单元和电极，所述第一存放单元包括设置有若干个贯通孔的基底，所述基底用于放置细胞，所述第二存放单元与所述贯通孔连通，用于放置所述外源性物质，所述电极分别与所述第一存放单元和第二存放单元连接；所述控制模块与所述电极连接，用于控制所述电极产生脉冲信号；所述方法包括：将处于对数生长期的细胞放置于所述基底表面，将含有所述外源性物质的溶液放置于所述第二存放单元内，使部分基底浸入至含有外源性物质的溶液中，且所述细胞不与所述含有外源性物质的溶液接触，得到反应体系；对所述反应体系进行通电，使所述外源性物质在脉冲信号下经过所述贯通孔进入所述细胞内；所述脉冲信号包括第一脉冲信号、第二脉冲信号和第三脉冲信号，其中：通过控制模块产生第一脉冲信号，其中，第一脉冲信号的第一电压U1为1-3V，第一脉冲信号的宽度为5-20ms，获取所述细胞在第一电压U1下的第一电流I1和第一电阻R1；根据所述第一电流I1确定第一状态，并根据所述第一状态确定阈值RI和步进电压Ustep；通过控制模块产生第二脉冲信号，其中，第二脉冲信号以第二电压U2为初始电压，所述第二电压U2大于第一电压U1，以步进电压Ustep逐渐递增，第二脉冲信号的宽度为5-20ms，第二脉冲信号的间隔为5-20ms；当第二电压U2以步进电压Ustep逐渐递增至第三电压U3，所述细胞的电阻随电流的变化率ΔRI呈减少趋势且小于等于阈值RI时，则产生第三脉冲信号，其中，第三脉冲信号的电压为第三电压U3，第三脉冲信号的宽度为10-50ms，第三脉冲信号的间隔为10-50ms，第三脉冲信号的个数为1-20个，完成通电过程；当第一电流I1小于5mA或大于320mA时，则细胞状态异常，终止通电；当第一电流I1为5-9mA时，则规定第一状态为StH1，对应的阈值RI为32ΩA-1，步进电压Ustep为1.2V；当第一电流I1为9-17mA时，则规定第一状态为StH2，对应的阈值RI为27ΩA-1，步进电压Ustep为1V；当第一电流I1为17-20mA时，则规定第一状态为StH3，对应的阈值RI为15ΩA-1，步进电压Ustep为0.7V；当第一电流I1为20-25mA时，则规定第一状态为StM1，对应的阈值RI为35ΩA-1，步进电压Ustep为1V；当第一电流I1为25-55mA时，则规定第一状态为StM2，对应的阈值RI为30ΩA-1，步进电压Ustep为0.8V；当第一电流I1为55-65mA时，则规定第一状态为StM3，对应的阈值RI为18ΩA-1，步进电压Ustep为0.6V；当第一电流I1为65-90mA时，则规定第一状态为StL1，对应的阈值RI为40ΩA-1，步进电压Ustep为0.8V；当第一电流I1为90-270mA时，则规定第一状态为StL2，对应的阈值RI为35ΩA-1，步进电压Ustep为0.75V；当第一电流I1为270-320mA时，则规定第一状态为StL3，对应的阈值RI为22ΩA-1，步进电压Ustep为0.5V；电阻随电流的变化率ΔRI的算法如下：①计算第二脉冲信号中，两个相邻脉冲下样品的电阻R：R2-1＝U2-1I2-1，R2-2＝U2-1+UstepI2-2U2-1、I2-1、R2-1为单个脉冲下的电压值、电流值和电阻，I2-2、R2-2为另一单个脉冲下的电流值和电阻；②计算细胞的电阻随电流的变化率ΔRI：ΔRI＝R2-1-R2-2I2-2-I2-1③ΔRI呈先增大后减小的趋势，当ΔRI衰减到阈值RI时，生成第三脉冲信号。

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