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申请/专利权人:浙江恒驭生物科技有限公司
摘要:本发明涉及分子生物检测领域,特别涉及一种重组型腺相关病毒制品中复制型腺相关病毒rcAAV8的检测组合物、方法及试剂盒。所述检测组合物包括序列表如SEQIDNO:1‑3所示的检测rcAAV8的引物和探针,具有高灵敏度、高特异性的优点。本发明还提供了一种重组型腺相关病毒制品中复制型腺相关病毒rcAAV8的检测试剂盒,利用本试剂盒能够准确、快速的检测样品中rcAAV8的含量。
主权项:1.一种非诊断或治疗目的的重组型腺相关病毒制品中复制型腺相关病毒rcAAV8的检测方法,其特征在于该方法包括以下步骤:S1、待测样品进行三轮细胞感染;以接种于六孔细胞培养板的HEK293T细胞作为每轮感染用的细胞,第一轮细胞感染后,三冻三融裂解细胞,收集细胞裂解物上清,在不稀释的情况下用细胞裂解物上清感染下一轮细胞,进行第二轮细胞感染,第二轮细胞感染后,三冻三融裂解细胞,收集细胞裂解物上清,在不稀释的情况下用细胞裂解物上清感染下一轮细胞,进行第三轮细胞感染,第三轮细胞感染后,收集细胞,提取总DNA;S2、采用检测组合物建立荧光定量PCR反应体系;所述检测组合物包括如下检测rcAAV8的引物和探针:上游引物:CCAACTCCATCACTAGGGGTTC,SEQIDNO:1,下游引物:TGCTCGTCAAGGTCGCTG,SEQIDNO:2,探针:5’-FAM-ACCTTAATCACAATCTCGTAA-BHQ1-3’,SEQIDNO:3,S3、进行荧光定量PCR检测;S4、待测样品的结果分析。
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百度查询: 浙江恒驭生物科技有限公司 重组型腺相关病毒制品中复制型腺相关病毒rcAAV8的检测组合物、方法及试剂盒
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