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申请/专利权人：大连理工大学

摘要：本发明公开了一种脱氧核酶探针在大肠杆菌耐药表型高通量传感中的应用，属于分析检测领域。所述脱氧核酶探针包括如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示的脱氧核苷酸链，以SEQIDNO.2为底物链，SEQIDNO.2含有一个RNA碱基A，且在该碱基两侧的T碱基上分别连接荧光基团F和荧光猝灭基团Q。在识别特异性目标蛋白后，SEQIDNO.1将SEQIDNO.2链切割至短链，进而产生荧光。该检测原理与具有高通量检测能力的液滴微流控系统相结合，可实现大肠杆菌的快速、高通量检测，并可有效区分耐药型和非耐药型大肠杆菌，进行细菌耐药表型分析，实现准确测定，可广泛应用于实际样本中大肠杆菌的耐药类型诊断，对实现污染控制、进一步防止抗生素滥用、阻止多药耐药菌的形成等方面具有重大意义。

主权项：1.一种脱氧核酶探针在大肠杆菌耐药表型高通量传感中的应用，其特征在于：所述脱氧核酶探针包括如SEQIDNO.1和SEQIDNO.2所示的脱氧核苷酸链，以SEQIDNO.2所示的脱氧核苷酸链为底物链，所述SEQIDNO.2所示的脱氧核苷酸链含有一个RNA碱基A，且在该碱基两侧的T碱基上分别连接荧光基团F和荧光猝灭基团Q；所述耐抗生素型大肠杆菌包括：耐四环素型大肠杆菌、耐卡那霉素型大肠杆菌、耐粘菌素型大肠杆菌、耐氯霉素型大肠杆菌；SEQIDNO.1与SEQIDNO.2所示的脱氧核苷酸链可部分进行碱基互补配对。所述SEQIDNO.1所示的脱氧核苷酸链具有识别、催化、切割功能，在检测到具有耐药表型的大肠杆菌所分泌的目标蛋白质时，SEQIDNO.1所示的脱氧核苷酸链催化底物SEQIDNO.2所示的脱氧核苷酸链切割至两条短链，将SEQIDNO.2所示的脱氧核苷酸链中的荧光基团F与荧光猝灭基团Q分离，产生荧光信号，完成大肠杆菌耐药表型的高通量传感；所述SEQIDNO.2所示的脱氧核苷酸链与SEQIDNO.1所示的脱氧核苷酸链混合即形成RFD-EC识别分子，SEQIDNO.1所示的脱氧核苷酸链的浓度为80～120μmolL，体积为2.5μL，SEQIDNO.2所示的脱氧核苷酸链的浓度为8～12μmolL，体积为0.5μL；所用抗生素与大肠杆菌的体积比为1:1。

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权利要求：

百度查询： 大连理工大学 一种脱氧核酶探针在大肠杆菌耐药表型高通量传感中的应用