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申请/专利权人：吉林大学

摘要：本发明专利公开了一种基于碳点@ZIF‑8和DNAzyme的铅离子比率荧光检测方法，属于纳米技术和分析检测领域。本发明将6‑羧基荧光素FAM标记在GR5DNAzyme的底物链上，当GR5DNAzyme的底物链和酶链杂交形成具有ssDNA环结构时，被吸附在碳点@ZIF‑8表面，FAM的荧光猝灭。在铅离子存在的情况下，GR5DNAzyme在底物链的RNA位点ra处断裂成两部分，短的FAM标记的ssDNA从碳点@ZIF‑8释放出来，荧光恢复。其520nm处荧光强度与445nm处荧光强度的比值与铅离子浓度在一定范围内呈线性关系线性范围0.1～10nM，检出限0.1nM。本方法能够灵敏特异、方便快捷的检测自来水、河水和鱼样中的铅离子，可进一步应用于研发重金属检测相关试剂盒、试纸条，对环境和食品中重金属离子的快速灵敏检测具有潜在的应用价值。

主权项：1.一种基于碳点@ZIF-8和DNAzyme的铅离子比率荧光检测方法，其步骤如下：1蓝色荧光碳点，简称CDs的制备：将0.21g柠檬酸和0.10g尿素加入并溶解于25mL超纯水中，将该混合物加入到容量为50mL的内衬为聚四氟乙烯的水热合成反应釜中，在烘箱中180℃条件下加热4小时，自然冷却至室温，将混合物在分子量为100-500Da的透析袋中透析24小时，经过真空干燥保存备用；2蓝色荧光碳点@ZIF-8，简称CDs@ZIF-8的制备：将12.5mM的ZnNO32·6H2O溶解在7.5mL甲醇中，向其中加入100μL浓度为2mgmL的CDs溶液，将两者混合后，再加入含有2.5mM2-甲基咪唑的7.5mL甲醇，在室温下避光静置反应12小时后，以10000rmin离心5分钟去除上清液，用甲醇清洗三次沉淀，收集CDs@ZIF-8复合材料，真空干燥后保存备用；3利用蓝色荧光CDs@ZIF-8复合材料和DNAzyme检测Pb2+：将50μL20nMGR5DNAzyme底物链F-GR5S和50μL20nM酶链GR5E在离心管中混匀后，95℃下恒温金属浴中保持5分钟，缓慢降至25℃，加入50μL不同浓度的铅离子标准溶液，并在25℃下避光孵育40分钟，加入50μL浓度为75μgmL溶解在水中的CDs@ZIF-8，25℃反应20分钟，加入300μL超纯水将反应体系定容在500μL，在室温下使用荧光分光光度计测定溶液的荧光发射光谱，检测350nm激发下CDs@ZIF-8在445nm处的发射荧光强度和495nm激发下FAM在520nm处的发射荧光强度，最终获得比率荧光信号F520F445用于Pb2+浓度的定量。

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