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一种外泌体结合蟾酥抗血液肿瘤的制备方法 

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申请/专利权人:广州中医药大学顺德医院(佛山市顺德区中医院)

摘要:本发明提供一种外泌体结合蟾酥抗血液肿瘤的制备方法,将蟾酥粉碎成通过15目筛的细粉,每次加入25‑40倍蟾酥量的75‑95%乙醇,加热回流提取2‑4次,每次提取2‑4小时,提取液滤过,滤液回收乙醇至无乙醇味,得溶液A;溶液A中,加入6倍蟾酥量,粒度为150‑250目的硅胶,蒸干,得上样硅胶,加入已装有硅胶的HPD‑100大孔树脂柱的顶端,洗脱,弃去洗脱液,洗脱至华蟾酥毒基和蟾毒灵混合物成分洗脱完全,得溶液B;溶液B加热回收溶剂至无溶剂味,减压干燥器内干燥48h,干燥得到蟾毒配基提取物以华蟾毒精计,蟾毒配基的重量百分含量为90%;整个处理工艺设计合理,可操作性强,处理效率高,可实现工业化生产。

主权项:1.一种外泌体结合蟾酥的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:1先将片状蟾酥研成细粉,按蟾酥药物粉末的质量毫克与水的体积毫升比为1:0.05-0.20混合,在0℃超声提取10-20min,4℃静置2小时,5000-25000rpm分钟离心分离,去除上清液,得到去除蟾酥药材中刺激性物质的蟾酥药材,使用粉碎机将蟾酥粉碎成通过15目筛的细粉,分别用石油醚、丙酮、乙酸乙酯、甲醇和水加热回流提取,丙酮提取液减压回收得浸膏,每次加入25-40倍蟾酥量的75-95%乙醇,加热回流提取2-4次,每次提取2-4小时,提取液滤过,滤液回收乙醇至无乙醇味,得溶液A;2溶液A中,加入6倍蟾酥量,粒度为150-250目的硅胶,蒸干,得上样硅胶,加入已装有硅胶的HPD-100大孔树脂柱的顶端,先以体积比为9:2的石油醚-丙酮混合溶剂为洗脱剂,洗脱,弃去洗脱液,继以体积比为8:1的石油醚-丙酮混合溶剂为洗脱剂,洗脱至华蟾酥毒基和蟾毒灵混合物成分洗脱完全,得溶液B;3溶液B加热回收溶剂至无溶剂味,减压干燥器内干燥48h,干燥得到蟾毒配基提取物以华蟾毒精计,蟾毒配基的重量百分含量为90%;4蟾毒配基提取物以华蟾毒精计的含量测定;所述硅胶柱的径高比为1:3-8,装量为溶液液A中蟾酥量的10-25倍。

全文数据:

权利要求:

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