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摘要：本发明涉及表达IBRV‑gD和BVDV‑E2的重组杆状病毒表达系统、构建方法及应用，属于生物技术领域，本发明利用杆状病毒表达系统成功表达重组蛋白gD、rgD、E2和E2BT，并对重组蛋白进行免疫原性分析。结果表明，rgD+E2BT二联亚单位疫苗可以诱导小鼠产生高水平的体液和细胞免疫应答，而且抗原表位的引入，增强了小鼠的体液和细胞免疫应答水平。本研究可为我国IBR和BVD的新型基因工程疫苗的研制提供新策略。
主权项：1.一种重组杆状病毒表达系统的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、以IBRV-gD和BVDV-E2基因序列为模板，设计并扩增重组基因rgD和E2BT；所述重组基因rgD编码蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：02所示，所述重组基因E2BT编码蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：04所示；步骤二、将重组基因rgD和E2BT分别与pFastBacDual载体连接，鉴定正确后，获得重组转移质粒pFBD-rgD和pFBD-E2BT；步骤三、将步骤二所得重组转移质粒分别转化感受态细胞，提取质粒，将鉴定，获得重组杆状病毒质粒rBac-rgD和rBac-E2BT；步骤四、将步骤三所得重组杆状病毒质粒分别转染sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒Ac-rgD和Ac-E2BT；步骤五、将经传代培养的重组杆状病毒分别感染Highfive细胞，经培养使其表达对应的重组蛋白。
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百度查询： 华南农业大学 表达IBRV-gD和BVDV-E2的重组杆状病毒表达系统、构建方法及应用
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