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申请/专利权人：康诺生物制药股份有限公司
摘要：本发明公开了一种SEC‑HPLC法测定玻璃酸酶的纯度的方法，涉及药物分析技术领域，包括以下步骤：选取色谱柱、流动相和检测器，且色谱条件为：色谱柱为TSKgelUP‑SW2000二醇基键合硅胶色谱柱，流动相为为0.2‑0.5molL磷酸二氢钠水溶液；配置供试液溶液和空白溶液；将溶液注入色谱柱进行分子排阻色谱分离，且流速为0.1‑0.5mlmin；柱温为25‑35℃；检测器检测吸光度检测信号并获取色谱图谱，并计算玻璃酸酶纯度。本发明使用SEC‑HPLC法，利用色谱柱将玻璃酸酶供试品溶液与空白溶液中不同分子量的分子分离，从而获取分离效果好的色谱图谱，并且通过设置适宜仪器及其反应条件，便于准确的对玻璃酸酶浓度进行分析测定，提高测定结果的准确性和精密性。
主权项：1.一种SEC-HPLC法测定玻璃酸酶的纯度的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：选取构成且用于实施SEC-HPLC法测定玻璃酸酶纯度的SEC-HPLC系统组成部分，其中SEC-HPLC系统组成部分包括色谱柱、流动相和检测器；步骤二：取玻璃酸酶的待测样品，制备供试品溶液作为测定用样品，并将测定用样品置于样品盘内，制备空白溶液作为对照用样品，并置于样品盘内；步骤三：将步骤二中的测定用样品和对照用样品通过手动进样器或自动进样器注入至SEC-HPLC系统的色谱柱内，并设置流动相推动条件，对测定用样品和对照用样品进行分子排阻色谱分离；步骤四：设置检测器波长条件，通过检测器获取待测定用样品和对照用样品的吸光度检测信号，并根据吸光度检测信号获取色谱图谱；步骤五：根据色谱图谱确定玻璃酸酶的峰值位置和面积，计算待测样品中的玻璃酸酶浓度；所述检测器为紫外检测器，所述检测器的波长条件为200—230nm。
全文数据：
权利要求：
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