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用于BCR-ABL融合基因四种亚型同时检测的系统 

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申请/专利权人:武汉大学

摘要:本发明公开了一种用于BCR‑ABL融合基因四种亚型同时检测的级联信号放大电感耦合等离子体质谱联用系统,属于生物技术领域。本发明系统包含四面体DNA捕获探针、不同亚型特异性H1‑P双链、四种四面体DNA支架、四种不同镧系元素标记的H6和H7信号探针和电感耦合等离子体质谱。本发明通过支点介导链置换结合杂交链式反应的级联信号放大技术直接对RNA进行转化再循环,整个检测过程无需对RNA进行扩增和逆转录,操作简单;整个检测过程闭管完成,降低了反应过程的污染,根据ICP‑MS检测的不同元素信息可实现BCR‑ABL融合基因不同亚型的快速便捷的结果判读;同时本发明具有较高的灵敏度,可适用于临床病人样本检测。

主权项:1.一种用于BCR-ABL融合基因四种亚型同时检测的级联信号放大电感耦合等离子体质谱联用系统,其特征在于:包含四面体DNA捕获探针、不同亚型特异性H1-P双链、四种四面体DNA支架、四种不同镧系元素标记的H6和H7信号探针和电感耦合等离子体质谱;BCR-ABL融合基因四种亚型为p190e1a2、p210e13a2、p210e14a2和p230e19a2;其中,所述的四面体DNA捕获探针由四条核酸链S1、S2、S3、S4杂交形成;S1链5’端至3’端组成为:与H1链5’端互补部分,T碱基间隔部分,与S4链5’端互补部分,随机间隔部分,与S2链中间段互补部分,随机间隔部分,与S3链3’端互补部分;S2链5’端至3’端组成为:与S3链5’端互补部分,随机间隔部分,与S1链中间段互补部分,随机间隔部分,与S4链3’端互补部分;S3链5’端至3’端组成为:与S2链5’端互补部分,随机间隔部分,与S4链中间段互补部分,随机间隔部分,与S1链3’端互补部分;S4链5’端至3’端组成为:与S1链中间段互补部分,随机间隔部分,与S3链中间段互补部分,随机间隔部分,与S2链3’端互补部分;H1-P双链由检测靶标结合链H1链和保护链P链杂交形成;H1链5’端至3’端组成为:与S1链5’端互补部分,T碱基间隔部分,间隔部分,与P链互补部分,随机部分;其中,H1链的间隔部分+与P链互补部分的一部分与检测靶标互补,且H1链上与检测靶标互补部分的长度大于H1链上的与P链互补部分;四面体DNA支架由四条核酸链H2、H3、H4、H5杂交形成;H2链5’端至3’端组成为:与H5链5’端互补部分,随机间隔部分,与H3链中间段互补部分,随机间隔部分,与H4链中间段互补部分,T碱基间隔部分,随机间隔部分,与H1链3’端互补部分;H3链5’端至3’端组成为:与H4链5’端互补部分,随机间隔部分,与H2链中间段互补部分,随机间隔部分,与H5链中间段互补部分,T碱基间隔部分,与H6链3’端互补部分;H4链5’端至3’端组成为:与H3链5’端互补部分,随机间隔部分,与H5链中间段互补部分,随机间隔部分,与H2链中间段互补部分,T碱基间隔部分,与H6链3’端互补部分;H5链5’端至3’端组成为:与H2链5’端互补部分,随机间隔部分,与H4链中间段互补部分,随机间隔部分,与H3链中间段互补部分,T碱基间隔部分,与H6链3’端互补部分;H6链5’端至3’端组成为:与H7链5’端互补部分,与H3、H4、H5和H7链3’端互补部分;H7链5’端至3’端组成为:与H6链5’端互补部分,与H6链3’端互补部分;H6链和H7链3’端修饰有4-8个甲基和巯基。

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权利要求:

百度查询: 武汉大学 用于BCR-ABL融合基因四种亚型同时检测的系统

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