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一种PCT/MIF/sTREM-1联合检测的荧光免疫层析试剂盒及其应用 

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申请/专利权人:浙江格物致知生物科技有限公司

摘要:本发明提供了一种精密度高,检测背景信号低,灵敏度高,线性范围宽,操作简单的PCTMIFsTREM‑1联合检测的荧光免疫层析试剂盒。所述PCTMIFsTREM‑1联合检测的荧光免疫层析试剂盒,包括荧光免疫层析试纸条,所述试纸条包括样品垫、荧光垫、底板、包被膜和吸水垫,所述样品垫、荧光垫、包被膜和吸水垫水平方向顺序连接固定于底板上,其中,所述包被膜上包被有检测线和质控线,所述荧光垫包括抗体标记的免疫荧光微球,所述抗体标记的免疫荧光微球包括PCT单克隆抗体标记的免疫荧光微球、MIF单克隆抗体标记的免疫荧光微球、sTREM‑1单克隆抗体标记的免疫荧光微球。

主权项:1.一种PCTMIFsTREM-1联合检测的荧光免疫层析试剂盒,包括荧光免疫层析试纸条,所述试纸条包括样品垫1、荧光垫(2)、底板3、包被膜8和吸水垫9,所述样品垫1、荧光垫2、包被膜8和吸水垫9水平方向顺序连接固定于底板3上,其中,所述包被膜8上包被有检测线和质控线7,其中,所述荧光垫2包括抗体标记的免疫荧光微球,所述抗体标记的免疫荧光微球包括PCT单克隆抗体标记的免疫荧光微球、MIF单克隆抗体标记的免疫荧光微球和sTREM-1单克隆抗体标记的免疫荧光微球;所述免疫荧光微球为内部填充铕粒子螯合物的免疫荧光微球,所述铕粒子螯合物的免疫荧光微球中铕Eu的固含量为0.5-2%wv%,所述免疫荧光微球的粒径为100~500nm;所述样品垫1为经过PBS缓冲液处理的样品垫1,所述PBS缓冲液包含0.5%(wv%)BSA,0.5%(wv%)Tween-20;所述荧光垫2的制备步骤包括:将抗体标记的免疫荧光微球混合溶液喷涂在荧光垫2上,烘干,制备得到包含抗体标记的免疫荧光微球的荧光垫2,所述抗体标记的免疫荧光微球混合溶液的浓度为:0.001%~0.1%wv%,所述荧光垫2的喷涂量为4-6μLcm;所述抗体标记的免疫荧光微球混合溶液的制备步骤包括:1将免疫荧光微球溶于MES缓冲溶液中,离心,除去上清;2加入MES缓冲溶液中,添加NHS和或EDC的活化剂,避光反应,离心,除去上清;3加入PBS缓冲液复溶,加入抗体反应,离心,除去上清;4加入浓度为0.5%(wv%)的BSA,进行封闭处理,离心,除去上清;5加入含有0.5%(wv%)BSA的PBS缓冲液再次复溶,得到抗体标记的免疫荧光微球混合溶液。

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权利要求:

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