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申请/专利权人：澳门大学

摘要：本发明公开了一类竹柏提取物、降二萜化合物及其在制备抗肺纤维化药物中的应用，涉及医药领域。本发明公开的竹柏提取物选自竹柏总提取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；降二萜化合物具有如式I、II或III所示的结构。本发明的研究显示，竹柏总提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物及具有该式I、II或III结构的降二萜化合物具有显著的抗肺纤维化活性，其可以用于制备抗肺纤维化药物中，作为活性物质或活性成分，为肺纤维化疾病的预防或治疗提供一种新的思路或手段。

主权项：1.降二萜化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肺纤维化药物中的应用，其特征在于，所述降二萜化合物选自竹柏内酯D、竹柏内酯E、竹柏内酯G、3β-羟基竹柏内酯F和竹柏内酯B中的至少一种。

全文数据：一类竹柏提取物、降二萜化合物及其在制备抗肺纤维化药物中的应用技术领域[0001]本发明涉及医药领域，具体而言，涉及一类竹柏提取物及降二萜化合物及其在制备抗肺纤维化药物中的应用。背景技术[0002]肺纤维化是各种不同致病因素所引起的肺间质疾病的共同结局，对人类健康危害极大。肺纤维化是一个较为复杂的生理病理过程，目前临床上仍然缺乏安全有效的治疗药物及手段。近年来从天然药用植物中寻找新型具有抗肺纤维化活性的化合物备受关注，在此基础上进一步开发安全有效的抗肺纤维化药物成为当前医学研究的热点。发明内容[0003]本发明的目的在于提供一类竹柏提取物、降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯，其具有抗肺纤维化活性。[0004]本发明的另一目的在于提供一类上述竹柏提取物、降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯的应用。[0005]本发明的另一目的在于提供一类抗肺纤维化药物。该药物具有抗肺纤维化活性。[0006]本发明的另一目的在于提供上述抗肺纤维化药物的制备方法。[0007]本发明是这样实现的：[0008]一类竹柏提取物，所述竹柏提取物选自药用植物竹柏Podocarpusnagi的总提取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物。[0009]上述竹柏提取物的制备方法参考如下：[0010]以竹柏的种子为原料，粉碎后用80-95%乙醇回流提取三次，浓缩得提取物（即上述的总提取物），用蒸馏水混悬提取物，依次用石油醚萃取三次、乙酸乙酯萃取三次得到上述的乙酸乙酯萃取物）、正丁醇萃取三次（得到上述的正丁醇萃取物），依次收集使用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和剩余水溶性提取物。[0011]—类降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯，其具有如下通式（I、（II或in所示的结构：[0012][0013]通式⑴和（II中：[0014]Rl至R3各自独立地为氢原子、羟基或者被保护基保护的羟基，或者Rl至R3中的任意相邻的两个基团与连接它们的碳原子一起形成环氧乙烷环，剩余一个为氢原子或羟基；[0015]R5为异丙基、乙基、1-羟基乙基、2-羟基异丙基或者被保护基保护的羟基；[0016]通式（III中：[0017]Rl至R4各自独立地为氢原子、羟基或者被保护基保护的羟基，或者Rl至R3中的任意相邻的两个基团与连接它们的碳原子一起形成环氧乙烷环；[0018]R5为异丙基、乙基、1-羟基乙基、2-羟基异丙基或者被保护基保护的羟基。[0019]进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述降二砲化合物选自竹柏内酯D、竹柏内酯E、竹柏内酯G、3β-羟基竹柏内酯F和竹柏内酯B。[0020]其中，竹柏内酯D的结构如下式IV所示：[0021][0022]竹柏内酯E的结构如下式V所示：[0023][0024]竹柏内酯G的结构如下式VI所示：[0025][0026]3β_羟基竹柏内酯F的结构如下式VII所示：[0027][0028]竹柏内酯B的结构如下式VIII所示：[0029][0030]降二萜类化合物广泛存在于罗汉松科植物中。该类化合物具有一定的抗肿瘤活性，能够抑制人结直肠癌等肿瘤细胞的增殖。我们前期从竹柏种子的乙酸乙酯和正丁醇萃取物分离了一系列降二萜类化合物，发现该类化合物具有显著的抗肿瘤活性，且部分化合物能够诱导肿瘤细胞发生自噬。此外，有报道降二萜类化合物竹柏内酯B具有抗动脉粥样硬化作用，能够抑制ApoE基因缺陷小鼠动脉粥样硬化。但目前尚无关于其抗肺纤维化活性的报道。[0031]转化生长因子-mTGF-m被广泛认为是导致纤维化的关键分子之一，对肺纤维化的发生发展中起重要作用，亦被广泛用来做为肺纤维化体外细胞模型的造模药物。气管软骨环间隙注入博莱霉素是目前最常用的复制肺纤维化动物模型的方法。本发明的研究在使用TGF-βΙ诱导肺泡上皮细胞株A549及RLE-6TN发生肌成纤维样转分化改变后进行药物筛选，发现竹柏提取物及如上所述的降二萜化合物具有显著的抗肺纤维化活性，并利用博莱霉素诱导的肺纤维化动物模型进行体内实验验证证实。[0032]基于此，如上所述的竹柏提取物、降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯可用于制备预防或抗肺纤维化药物，或者用于制备用于抑制细胞纤维化相关蛋白表达的抑制剂等领域中，为肺纤维化疾病的预防或治疗提供一种新的思路或手段。[0033]如上所述的竹柏提取物、降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯在制备抗肺纤维化药物中的应用。[0034]进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述肺纤维化由转化生长因子-m导致或药物因素导致。[0035]如上所述的竹柏提取物、降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯在制备用于抑制细胞纤维化相关蛋白表达的抑制剂中的应用。[0036]进一步地，在本发明的一些实施方案中，细胞纤维化相关蛋白选自I型胶原蛋白、纤连蛋白、结缔组织生长因子、波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的一种或几种。[0037]一类抗肺纤维化药物，其含有如上所述的竹柏提取物、降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯。[0038]进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述抗肺纤维化药物还含有药学上可接受的辅料。[0039]进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述药学上可接受的辅料选自助溶剂、赋形剂、乳化剂、防腐剂、助悬剂、防腐剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、表面活性剂或矫味剂中的一种或几种。[0040]进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述抗肺纤维化药物为注射剂、气雾剂、膏剂、贴剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、糖浆剂、丸剂。[0041]—种制备如上所述的抗肺纤维化药物的方法，其包括:经如上所述的竹柏提取物、降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯与药学上可接受的辅料混合。[0042]进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述药学上可接受的辅料选自助溶剂、赋形剂、乳化剂、防腐剂、助悬剂、防腐剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、表面活性剂或矫味剂中的一种或几种。[0043]进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述抗肺纤维化药物为注射剂、气雾剂、膏剂、贴剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、糖浆剂、丸剂。附图说明[0044]为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。[0045]图1为本发明实施例1中的竹柏总提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物显著抑制TGF-m诱导的A549、RLE-6TN细胞间质样形态学改变的检测结果；[0046]图2为本发明实施例2中的竹柏总提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物显著抑制TGF-m诱导的A549、RLE-6TN细胞纤维化相关蛋白的变化的检测结果；[0047]图3为本发明实施例3中的降二萜化合物竹柏内酯D、竹柏内酯E、竹柏内酯G、3β_羟基竹柏内酯F、竹柏内酯B显著抑制TGF-βΙ诱导的A549、RLE-6TN细胞间质样形态学改变的检测结果；[0048]图4为本发明实施例4中的降二萜化合物竹柏内酯D、竹柏内酯E、竹柏内酯G、30-羟基竹柏内酯F、竹柏内酯B显著抑制TGF-βΙ诱导的A549、RLE-6TN细胞纤维化相关蛋白的变化的检测结果；[0049]图5为本发明实施例5中的竹柏内酯D对博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠肺组织的HE和Masson’strichrome染色在光镜下200X倍数下的观察结果；[0050]图6为本发明实施例6中的竹柏内酯D对博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠肺组织中羟脯氨酸含量的影响；图中：*代表:与假手术组比较，P〈〇.05;#代表:与博莱霉素模型对照组比较，P〈〇.〇5;[0051]图7为本发明实施例7中的竹柏内酯D对博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠肺组织中CollagenIXollagenIII蛋白表达的影响结果；图中代表:与假手术组比较，P〈0.05;#代表:与博莱霉素模型对照组比较，P〈〇.05。具体实施方式[0052]为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。[0053]以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。[0054]实施例1[0055]竹柏提取物显著改善TGF-βΙ诱导的肺纤维化细胞模型形态学改变[0056]A549细胞与RLE-6TN细胞接种于6孔板贴壁培养过夜，分别设置对照组、模型组、提取物组。其中，对照组以培养基继续培养48小时，模型组以5ngmLTGF-βΙ处理48小时，提取物组以5ngmLTGF-m与各提取物竹柏总提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物共同处理48小时，提取物设置lOygmL浓度。48小时后各组细胞分别于倒置光学显微镜下随机视野进行形态学拍照。结果如图1所示。[0057]由图1可见，TGF-m诱导的模型组A549、RLE-6TN细胞形态上成为梭形，呈现间质细胞样形态，竹柏总提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物的同步处理能够显著改善细胞的间质样形态学改变。[0058]实施例2[0059]竹柏提取物显著改善TGF-βΙ诱导的细胞模型肺纤维化指针变化[0060]A549细胞与RLE-6TN细胞接种于6孔板贴壁培养过夜，分别设置对照组、模型组、提取物组。其中，对照组以培养基继续培养48小时，模型组以5ngmLTGF-βΙ处理48小时，化合物治疗组以5ngmLTGF-βΙ与各提取物竹柏总提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物共同处理48小时，提取物分别设置5ygmL和lOygmL浓度。48小时后用细胞刮将细胞刮下，以细胞裂解液在冰上裂解20分钟，于4°C，15000转分钟离心20分钟后吸取上清液，以BCA™试剂盒测定蛋白浓度，加入相应量的蛋白上样缓冲液95°C变性5分钟。按20yg的上样量以WesternBlot法测定蛋白的表达。结果见图2。[0061]TGF-βΙ诱导细胞纤维化的过程中，会引起一系列纤维化标志蛋白的改变，包括I型胶原蛋白（CollagenI、纤连蛋白（Fibronectin、结缔组织生长因子CTGF、波形蛋白Vimentin、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA等的上调。由图2可见，竹柏总提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物的处理能够显著抑制TGF-βΙ诱导的模型组A549、RLE-6TN细胞纤维化相关蛋白的变化。[0062]实施例3[0063]降二萜化合物显著改善TGF-βΙ诱导的肺纤维化细胞模型形态学改变[0064]A549细胞与RLE-6TN细胞接种于6孔板贴壁培养过夜，分别设置对照组、模型组、化合物治疗组。其中，对照组以培养基继续培养48小时，模型组以5ngmLTGF-βΙ处理48小时，化合物治疗组以5ngmLTGF-βΙ与各化合物竹柏内酯D、竹柏内酯E、竹柏内酯G、3β-羟基竹柏内酯F、竹柏内酯Β共同处理48小时，化合物均设置4μΜ浓度。48小时后各组细胞分别于倒置光学显微镜下随机视野进行形态学拍照。结果见图3。[0065]由图3可见，TGF-βΙ诱导的模型组A549、RLE-6TN细胞形态上成为梭形，呈现间质细胞样形态，降二萜化合物竹柏内酯D、竹柏内酯E、竹柏内酯G、3β-羟基竹柏内酯F、竹柏内酯B的同步处理能够显著改善细胞的间质样形态学改变。[0066]实施例4[0067]降二萜化合物显著改善TGF-βΙ诱导的细胞模型肺纤维化指针变化[0068]A549细胞与RLE-6TN细胞接种于6孔板贴壁培养过夜，分别设置对照组、模型组、化合物治疗组。其中，对照组以培养基继续培养48小时，模型组以5ngmLTGF-βΙ处理48小时，化合物治疗组以5ngmLTGF-βΙ与各化合物竹柏内酯D、竹柏内酯E、竹柏内酯G、3β-羟基竹柏内酯F、竹柏内酯Β共同处理48小时，化合物分别设置2μΜ和4μΜ浓度。48小时后用细胞刮将细胞刮下，以细胞裂解液在冰上裂解20分钟，于4°C，15000转分钟离心20分钟后吸取上清液，以BCA™试剂盒测定蛋白浓度，加入相应量的蛋白上样缓冲液95°C变性5分钟。按20yg的上样量以WesternBlot法测定蛋白的表达。结果见图4。[0069]由图4可见，降二萜化合物竹柏内酯D、竹柏内酯E、竹柏内酯G、3β-羟基竹柏内酯F、竹柏内酯B的处理能够显著抑制TGF-βΙ诱导的模型组A549、RLE-6TN细胞纤维化相关蛋白的变化。[0070]实施例5[0071]竹柏内酯D显著改善肺纤维化模型小鼠肺组织病理学变化[0072]小鼠30只，按体重随机分为3组，每组10只小鼠，分别为假手术组、模型对照组、竹柏内酯D组。各组小鼠腹腔注射苯巴比妥钠50mgkg麻醉后，乙醇消毒颈部皮肤，于颈中部作钝性分离，暴露气管，模型组和竹柏内酯D组于气管软骨环间隙缓慢注入博莱霉素50yL3.5mgkg，对照组注入相同体积的生理盐水。注入后立即直立旋转小鼠，使液体在双肺均勾分布，并缝合颈部皮肤。自造模第7天起，按l〇mLkg体积腹腔注射给予竹柏内酯DIOmgkg，每天1次，连续15次;假手术组及模型对照组小鼠每日腹腔注射同体积生理盐水。实验动物于造模21天后处死，取右肺下叶组织，置于4%多聚甲醛溶液中固定，常规石蜡包埋、切片，苏木素-伊红HE染色观察肺组织验证、细胞变性和纤维化状况，马松三色Masson’strichrome染色法观察肺组织内胶原纤维增生情况。[0073]小鼠肺组织切片HE染色结果见图5,假手术组小鼠肺组织结构清晰，肺泡呈多边形囊状小体，肺泡腔内无分泌物，肺泡上皮结构完整，肺泡壁未见增厚，肺泡隔中未见炎性细胞，可见丰富毛细血管。博莱霉素模型组小鼠肺泡结构紊乱，肺泡壁明显增厚，肺泡隔中巨噬细胞和淋巴细胞浸润明显，并可见较多的纤维组织增生。与模型组相比，竹柏内酯D给药组小鼠肺组织内炎性细胞浸润及肺组织实质病变明显减少，肺泡隔胶原纤维增生灶明显减少，肺泡结构基本正常。[0074]Masson’strichrome染色结果显示，假手术组小鼠细支气管壁及肺泡隔仅有少量蓝色胶原纤维沉积（图5。模型组小鼠细支气管管壁及周围，肺泡壁及间隔可见大量的蓝染胶原纤维。竹柏内酯D给药组小鼠肺泡壁有轻度增厚，仅有少量炎症细胞浸润和蓝染的胶原纤维沉积。[0075]实施例6[0076]竹柏内酯D显著降低肺纤维化模型小鼠肺组织中羟脯氨酸含量[0077]小鼠30只，按体重随机分为3组，每组10只小鼠，分别为假手术组、模型对照组、竹柏内酯D组。各组小鼠腹腔注射苯巴比妥钠50mgkg麻醉后，乙醇消毒颈部皮肤，于颈中部作钝性分离，暴露气管，模型组和竹柏内酯D组于气管软骨环间隙缓慢注入博莱霉素50yL3.5mgkg，对照组注入相同体积的生理盐水。注入后立即直立旋转小鼠，使液体在双肺均勾分布，并缝合颈部皮肤。自造模第7天起，按l〇mLkg体积腹腔注射给予竹柏内酯DIOmgkg，每天1次，连续15次;假手术组及模型对照组小鼠每日腹腔注射同体积生理盐水。实验动物于造模21天后处死，准确称取50mg右肺上叶组织，按试剂盒说明碱水解法检测羟脯氨酸含量。[0078]进一步检测肺组织内胶原纤维I特征性成分羟脯氨酸含量发现，与假手术组比较，博莱霉素模型组小鼠肺组织中羟脯氨酸含量明显升高P〈〇.05;图6。与模型组比较，竹柏内酯D能显著降低小鼠肺组织中羟脯氨酸含量P〈0.05。[0079]实施例7[0080]竹柏内酯D显著降低肺纤维化模型小鼠肺组织中I、III型胶原蛋白表达[0081]小鼠30只，按体重随机分为3组，每组10只小鼠，分别为假手术组、模型对照组、竹柏内酯D组。各组小鼠腹腔注射苯巴比妥钠50mgkg麻醉后，乙醇消毒颈部皮肤，于颈中部作钝性分离，暴露气管，模型组和竹柏内酯D组于气管软骨环间隙缓慢注入博莱霉素50yL3.5mgkg，对照组注入相同体积的生理盐水。注入后立即直立旋转小鼠，使液体在双肺均勾分布，并缝合颈部皮肤。自造模第7天起，按l〇mLkg体积腹腔注射给予竹柏内酯DIOmgkg，每天1次，连续15次;假手术组及模型对照组小鼠每日腹腔注射同体积生理盐水。实验动物于造模21天后处死，取部分肺组织液氮速冻，采用WesternBlot法测定细胞外基质成分Ι、ΠΙ型胶原蛋白表达水平。[0082]如图7所示，假手术组仅表达少量Ι、ΙΙΙ型胶原蛋白（CollagenIXollagenIII，博莱霉素诱导的肺纤维化模型组有明显上调的I、III型胶原蛋白表达;与模型组比较，竹柏内酯D组的CollagenIXollagenin表达水平明显低于博莱霉素模型组P〈0.05，提示竹柏内酯D可明显减少肺组织中胶原成分的沉积，改善肺纤维化程度。[0083]实施例8[0084]本实施例提供了实施例1-7中所用的竹柏提取物及不同部位的制备方法，及竹柏内酯D、竹柏内酯E、竹柏内酯G、30-羟基竹柏内酯F、竹柏内酯B的分离方法。[0085]以药用植物竹柏Podocarpusnagi的种子15kg为原料，粉碎后用40L80-95%乙醇回流提取三次，浓缩得提取物，用蒸馏水混悬提取物，依次用石油醚萃取三次、乙酸乙酯萃取三次、正丁醇萃取三次，收集使用石油醚得到的提取物174.6g，收集使用乙酸乙酯得到的提取物138.7g，收集使用正丁醇得到的提取物78.3g，和剩余水溶性提取物878.2g。[0086]将使用乙酸乙酯萃取得到的提取物用MCI树脂分离，以0-100%甲醇水梯度洗脱，在20%甲醇部位，以及40%甲醇部位分别析出晶体，鉴定为竹柏内酯B以及竹柏内酯D;在70%甲醇洗脱段经过硅胶柱层析，流动相氯仿甲醇19:1洗脱后析出晶体得到化合物竹柏内酯E和竹柏内酯G。[0087]将正丁醇段提取物经过MCI柱层析，甲醇水比例19:1到1:19进行洗脱，将MCI柱层析10:1洗脱段合并并经过硅胶柱层析氯仿甲醇60:1到5:1进行洗脱，将15:1洗脱段合并并经过高效制备液相45%乙腈进行洗脱得到化合物3β-羟基竹柏内酯F。[0088]竹柏内酯Β:丙酮中结晶，白色针状晶体，mpSSOnFzCliffiMO.EI-MSzmz364Μ+，347M+-OH，346M+-H2O。1HMlR600MHz,C5D5Nδ4·32d，J=6·IHz，IH，H-1,4.28ddd，J=4.6,6.1，13·1Ηζ，1Η，Η-2，2·10dd，J=13.1，4·5Ηζ，1Η，Η-3α,2.74dd，J=13·1，13·1Ηζ，1Η，Η-3β，1.89d，J=6.6Hz，lH，H-5，5.16dd，J=6.6,8.4Hz，lH，H-6，5.64d，J=8.4Hz，lH，H-7,7.01s，lH，H-ll,3.47m，J=6.7Hz，lH，H-15,1.27,1.241,J=6.8Hz，6H，Me-16，Me-17,2.01s，3H，Me-18,1.45s，3H，Me-20。[0089]竹柏内酯D:丙酮中结晶，无色针状晶体，mp265-266°CDMF:CisH2QO6·ESI-MS:mz333[M+H]+，355[M+Na]+，687[2M+Na]+。1HNMR400MHz，CDCl3δ3·63d，J=4·3Hz，1H，H-l，3.48dd，J=4.3,6.7Hz，lH，H-2，4.48d，J=6.7Hz，lH，H-3,1.91d，J=6.5Hz，lH，H-5，5.0m，H-6,3.46dd，J=10.4,16.4Hz，1Η，Η-7α,2.80dd，J=7.1，16.4Hz，1Η，Η-7β，6.35s，lH，H-ll，2.64q，J=7.5Hz，lH，H-15,1.18t，J=7.5Hz，3H，Me-16,1.43s，3H，Me-18,1.26s，3H，Me-20,3C匪R100MHz，CDC13:57.1C-I，50.5C-2，67.5C-3，48·6C-4，50·5C-5，73·2C-6，25·5C-7，106·7C-8，163·6C-9，37·6C-10，106.2C-Il,161.9C-12,162.9C-14,24.6C-15,11.7C-16,25.8C-18,178.2C-19,17.5020。[0090]竹柏内酯E:丙酮中结晶，无色针状晶体，mp295ΠΡ:：ΐ9Η24〇6·ΕΙ-Μ5:πιζ348M+NMR600MHz，DMS0S3.50m，lH，H-3，1.821,J=4.6Hz，lH，H-5,15.00dd，J=4.1，1.3Hz，lH，H-6，4.20d，J=1.3Hz，lH，H-7,5.96s，H-ll，4.63d，J=2.9Hz，lH，H-14，1.97m,H-15,0.97d,J=6.8Hz,3H,Me-16,0.94d,J=6.7Hz,3H,Me-17,1.32s,3H,Me-18,1.07s,3H,Me-20C313CNMR125MHz,DMS036.1C-I,44.802,71.303,44.2C-4,28.8C-5,71.7C-6,53.5C-7,58.3C-8,159.0C-9,27.8C-10,116.2ΟΙI,163.8C-12,82.1C-14,25.9C-15,16.3C-16,23.7C-17,21.3C-18,178.5C-19,21.1C-20。[0091]竹柏内酯G:丙酮中结晶，无色针状晶体，mp296-298°CC3Mf=Ci9H24O5EsI-MS=IiiZz333[M+H]+，355[M+Na]+，687[2M+Na]+。1HNMR400MHz，CDCl31·85d，J=5Hz，IH，H-5，4·91dd，J=2.6,5.9Hz，lH，H-6,3.95d，J=2.6Hz，1Η，Η-7,4.40d，J=5.IHz，1H，H-14，δ5.95s，lH，H-ll，1.10d，J=7Hz，6H，Me-16，Me-17，1.28s，3H，Me-18，1.15s，3H，Me-20;13CNMRKOHz,CDCl329.7C-I,17.5C-2,26.8C-3,41.9C-4,43.8C-5,72.4C-6,53.7C-7,58.1C-8,159.0C-9,36.0C-10，117.0C-Il,163.5C-12,82.9C-14,28.4C-15,16.4C-16,21.3C-17,25.1C-18,180.0019,24.1C-20。[0092]3β-羟基竹柏内酯F:甲醇中结晶，黄色粒状晶体。MF:C19H24〇5.ESI-MS:mz333[M+HJ+-1HNMR600MHz,DMSO2.02dJ=4.2Ηζ,1Η,H-5,5.16dd,J=5.2,2.6Hz,1Η,Η-6,6.32d,J=2.6Hz,lH,H-7,5.02m,H-14,55.73s,1H,H-11,1.09d,J=7.2Hz,6H,Me-16，Me-17,0.89s，3H，Me-18,0.87s，3H，Me-20。[0093]以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

权利要求：1.一类竹柏提取物，其特征在于，所述竹柏提取物选自竹柏总提取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物。2.—类降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯，其特征在于，其具有如下通式（I、II或（III所示的结构：通式⑴和II中：Rl至R3各自独立地为氢原子、羟基或者被保护基保护的羟基，或者Rl至R3中的任意相邻的两个基团与连接它们的碳原子一起形成环氧乙烷环，剩余一个为氢原子或羟基；R5为异丙基、乙基、1-羟基乙基、2-羟基异丙基或者被保护基保护的羟基；通式III中：Rl至R4各自独立地为氢原子、羟基或者被保护基保护的羟基，或者Rl至R3中的任意相邻的两个基团与连接它们的碳原子一起形成环氧乙烷环；R5为异丙基、乙基、1-羟基乙基、2-羟基异丙基或者被保护基保护的羟基。3.根据权利要求2所述的降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯，其特征在于，所述降二萜化合物选自竹柏内酯D、竹柏内酯E、竹柏内酯G、3β-羟基竹柏内酯F和竹柏内酯B。4.权利要求1所述的竹柏提取物、或权利要求2-3任一项所述的降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯在制备抗肺纤维化药物中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述肺纤维化由转化生长因子-m或药物因素导致。6.权利要求1所述的竹柏提取物、或权利要求2-3任一项所述的降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯在制备用于抑制细胞纤维化相关蛋白表达的抑制剂中的应用。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，细胞纤维化相关蛋白选自I型胶原蛋白、纤连蛋白、结缔组织生长因子、波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的一种或几种。8.—类抗肺纤维化药物，其特征在于，其含有权利要求1所述的竹柏提取物，或权利要求2-3任一项所述的降二萜化合物或其药学上可接受的盐或酯。9.根据权利要求8所述的抗肺纤维化药物，其特征在于，所述抗肺纤维化药物还含有药学上可接受的辅料。10.根据权利要求9所述的抗肺纤维化药物，其特征在于，所述药学上可接受的辅料选自助溶剂、赋形剂、乳化剂、防腐剂、助悬剂、防腐剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、表面活性剂或矫味剂中的一种或几种。11.根据权利要求8-10任一项所述的抗肺纤维化药物，其特征在于，所述抗肺纤维化药物为注射剂、气雾剂、膏剂、贴剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、糖浆剂、丸剂。

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