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一种高效制备产黑色素短梗霉原生质体及再生的方法 

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申请/专利权人:天津科技大学

摘要:本发明提供了一种产黑色素短梗霉原生质体的制备和再生方法,具体制备方法包括菌体培养和收集、菌体预处理、酶解、菌体纯化、再生,本发明的制备方法获得的产黑色素短梗霉原生质体制备率较高可达92.6%,原生质体再生率较高,可达61.34%,并且步骤简单,操作更方便,原生质体活性更好。

主权项:1.一种产黑色素短梗霉原生质体,其特征在于,所述的产黑色素短梗霉原生质体是通过产黑色素短梗霉菌体培养和收集、菌体预处理、菌体酶解、菌体纯化、原生质体再生的制备方法获得的;所述的产黑色素短梗霉Aureobasidiummelanogenum,BCSW001,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏日期为2019年11月22日,保藏编号为:CGMCCNO.18996;所述产黑色素短梗霉原生质体的制备和再生方法包括以下步骤:1菌体培养和收集:将斜面培养的产黑色素短梗霉菌株接种于YEPD培养基中进行培养,培养结束后离心收集菌体;2菌体预处理:用缓冲剂I洗菌并收集菌体2次,然后重悬;3菌体酶解:采用崩溃酶酶溶液对预处理过的菌体进行酶解得到原生质体粗酶液;4菌体纯化:向酶解获得的原生质体粗酶液中加入渗透压缓冲剂后洗菌、重悬,得到原生质体溶液:5原生质体再生:用含有1molL山梨糖醇的YEPD培养基对原生质体洗菌,并复苏培养,再用TB3双层平板进行原生质体再生培养;其中步骤2中缓冲剂I为用超纯水配置的含有1molL山梨糖醇和50mmolL柠檬酸钠的溶液。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 天津科技大学 一种高效制备产黑色素短梗霉原生质体及再生的方法

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