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申请/专利权人：深圳市人民医院
摘要：本发明公开了一种促进人胚胎干细胞均一分化为限定性内胚层细胞的方法。本发明提供了一种促进人胚胎干细胞分化为限定性内胚层细胞的方法，包括如下步骤：在促进人胚胎干细胞向限定性内胚层细胞分化的过程中，在分化培养基中加入G1期抑制剂，实现促进人胚胎干细胞分化为限定性内胚层细胞。本发明采用G1期小分子抑制剂进行干预，没有引入外源基因的风险；本发明通过添加Palbociclib，显著提高限定性内胚层细胞强阳性SOX17细胞亚群比例。本发明对于获得更高比例的强阳性SOX17细胞进而提高DE细胞均一度，增强其分化能力而言具有重要意义。
主权项：1.一种促进人胚胎干细胞分化为限定性内胚层细胞的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：（A1）将人胚胎干细胞在额外添加有帕博西尼的第一阶段诱导培养液中诱导培养，使人胚胎干细胞分化为中内胚层细胞；所述第一阶段诱导培养液为将ITS-supplement、ActivinA的储存溶液和Wnt3A的储存溶液加入到仅含有浓度为0.05g100mL的BSA的限定性内胚层分化基础培养基中，并使所述ITS-supplement体积含量为0.2‰，所述ActivinA的终浓度为100ngmL，所述Wnt3A的终浓度为50ngmL；在所述第一阶段诱导培养液中额外添加的帕博西尼的终浓度为2μM；（A2）将步骤（A1）所得中内胚层细胞在额外添加有帕博西尼的第二阶段诱导培养液中诱导培养，使中内胚层细胞分化为限制性内胚层细胞；所述第二阶段诱导培养液为将ITS-supplement和ActivinA的储存溶液加入到仅含有浓度为0.2g100mL的BSA的限定性内胚层分化基础培养基中，并使所述ITS-supplement体积含量为0.5‰，所述ActivinA的终浓度为100ngmL；在所述第二阶段诱导培养液中额外添加的帕博西尼的终浓度为2μM；所述限定性内胚层分化基础培养基为RPMI1640。
全文数据：
权利要求：
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