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申请/专利权人：泰州医药城国科化物生物医药科技有限公司
摘要：本发明公开一种人乳寡糖LNFPI对照品的制备方法，本发明的方法包括以下步骤：首先以人乳中性糖总样为原料；然后溶解所述的人乳中性糖总样，并使用亲水色谱填料，流动相为水和有机溶剂，使用梯度或等度方式进行洗脱，获得LNFPI粗品；再然后溶解LNFPI粗品，并使用多孔石墨碳材料为色谱柱固定相，流动相为碱水和有机溶剂，使用梯度或等度方式进行洗脱，获得LNFPI纯品；最后浓缩并冷冻干燥LNFPI纯品，即获得人乳寡糖LNFPI对照品，该方法具有选择性好，分离效率高，稳定性好，操作简便可控等特点，适用于放大制备。
主权项：1.一种人乳寡糖LNFPI对照品的制备方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：S1、以人乳中性糖总样为原料，由以下步骤的方法制备得到：1.1取人乳样品在0-10℃条件下离心5-150min除去上层脂质，即得脱脂母乳样品，再加入1-5倍体积量的乙醇至脱脂母乳样品中，混匀，于0-10℃静置2-48小时后，于0-10℃条件下离心5-150min，收集上层液，蒸干后即得脱脂除蛋白的样品；1.2利用硅胶表面键合天冬氨酸极性基团的填料柱色谱分离脱脂除蛋白的样品，采用体积浓度20-80%的乙醇水溶液溶解脱脂除蛋白的样品，流动相为2-12mM乙酸铵缓冲盐溶液和乙醇溶液，缓冲盐水溶液的体积浓度从小到大变化，起始体积浓度为5-60%，终止体积浓度为40-95%，收集在3-40倍柱体积的流出液，将流出液浓缩冻干，即为步骤S1中所述的中性糖总样；S2、所述的人乳中性糖总样与第一溶剂混合，溶解并得到第一混合物，并使用亲水色谱填料，所属亲水色谱填料为硅胶表面键合半胱氨酸极性基团的填料，流动相为水和甲醇、乙醇的混合物，使用梯度或等度方式进行洗脱，利用柱色谱分离获得LNFPI粗品；S3、所述的LNFPI粗品与第二溶剂混合，溶解并得到第二混合物，并利用多孔石墨碳材料为色谱柱固定相，流动相为碱水和乙腈，所述碱水溶液为0.2%-0.6%的氢氧化铵水溶液，使用梯度或等度方式进行洗脱，利用柱色谱分离获得LNFPI纯品；S4、浓缩并冷冻干燥LNFPI纯品，即获得人乳寡糖LNFPI对照品。
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权利要求：
百度查询： 泰州医药城国科化物生物医药科技有限公司 一种人乳寡糖LNFP I对照品的制备方法
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