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申请/专利权人:浙江工商大学
摘要:本发明属于生物检测技术领域,具体涉及一种基于RPA结合CRISPRCas12a恒温扩增技术核酸检测系统及其检测方法与应用。本发明通过将优化选择的RPA和CRISPRCas12a反应分离到两个不相邻的反应室中分隔进行,有助于简化操作,同时有效避免两个反应之间的相互干扰和扩增产物的污染。本发明通过设计一体化、可视化检测装置,将微流控芯片上的RPA扩增反应、CRISPRCas12a反应和检测结果的观察相结合,凭肉眼可直接观察到检测结果。通过设计微流控芯片将RPA和CRISPR反应检测结合在一个封闭的空间中,使加样、反应、观察等全过程实现闭管,最大限度地降低了与核酸转移相关的污染风险,具有核酸提取操作简便、耗时短、携带方便、检测可视化、密封性好的优良特性,有助于在实时现场检测中推广应用。
主权项:1.一种基于RPA结合CRISPRCas12a恒温扩增技术核酸检测系统,其特征在于,包括:微流控芯片1,其上设置有RPA反应室2、RPA反应液分隔室3以及CRISPRCas12a反应室4,所述微流控芯片1用于将核酸提取物引入RPA反应室2内,对核酸提取物中的靶标DNA进行扩增,再将扩增后的核酸提取物流动至RPA反应液分隔室3以及CRISPRCas12a反应室4,对流入CRISPRCas12a反应室4中的扩增后的核酸提取物进行靶标DNA检测;检测装置5,其包括用于提供光源的发光组件6以及用于核酸检测的测试组件7,所述测试组件7包括第一壳体8以及用于容纳微流控芯片1的反应腔9,所述第一壳体8的顶部且位于反应腔9上方设置有观察孔10,所述第一壳体8的侧面设置有用于插接微流控芯片1且与反应腔9相连通的芯片插孔11,所述反应腔9内还设置有用于对微流控芯片1进行加热的加热组件12。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 浙江工商大学 基于RPA结合CRISPR/Cas12a恒温扩增技术核酸检测系统及其检测方法与应用
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