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申请/专利权人：广州达博生物制品有限公司
摘要：本发明公开了一种稳定高表达人源悬浮细胞系的构建方法，涉及生物技术领域。所述构建方法包括以下步骤：1合成BaEVless序列，并将其替换pVSVG载体中的VSVG序列，得到pBaEVless载体；2、1接种细胞至培养体系中进行培养；2进行质粒转染，使用四质粒系统，载体质粒、包装质粒1、包装质粒2、pBaEVless载体进行转染；3离心，过滤，收集上清；4浓缩，得BaEVless包膜慢病毒；3加入对应MOI的慢病毒感染目的细胞，并加入促感染试剂。本发明的构建方法能够增强慢病毒的感染能力，更加高效的构建基因高表达的稳转悬浮细胞系。
主权项：1.一种人源悬浮细胞系的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：1合成pBaEVless载体：合成BaEVless序列，并将其替换pVSVG载体中的VSVG序列，得到pBaEVless载体；所述的BaEVless序列如SEQIDNO.1所示，pVSVG载体序列如SEQIDNO.2所示，VSVG序列如SEQIDNO.3所示；2BaEVless包膜慢病毒包装：1接种细胞至培养体系中进行培养；2进行质粒转染，使用四质粒系统，载体质粒、包装质粒1、包装质粒2、pBaEVless载体进行转染；3离心，过滤，收集上清；4浓缩，得BaEVless包膜慢病毒；3目的细胞感染BaEVless包膜慢病毒：加入对应MOI的慢病毒感染目的细胞，并加入促感染试剂。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 广州达博生物制品有限公司 一种稳定高表达人源悬浮细胞系的构建方法
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