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申请/专利权人：涌源合生科技(深圳)有限公司
摘要：本申请提供了一种大片段DNA的合成方法。包括：对子片段DNA进行聚合酶链式反应扩增，得到5'端含有脱氧尿嘧啶核苷酸的扩增片段DNA；采用尿嘧啶特异性切除试剂识别并切除扩增片段DNA中含有脱氧尿嘧啶核苷酸的特定单链末端，得到3'端形成粘性单链末端的粘性片段DNA；将各个粘性片段DNA混合并进行退火处理，使相邻粘性片段DNA的粘性单链末端通过氢键结合，得到混合片段DNA；将混合片段DNA转化到宿主细胞中，通过宿主细胞的自然修复机制使相邻的粘性片段DNA通过磷酸二酯键结合，得到大片段DNA。通过特异性识别和切除含有尿嘧啶的DNA，可以精准生成具有互补的长粘性末端的DNA，进而实现无缝连接和高效重组。
主权项：1.一种大片段DNA的合成方法，其特征在于，包括：对子片段DNA进行聚合酶链式反应扩增，得到扩增片段DNA；其中，所述扩增片段DNA的5'端含有脱氧尿嘧啶核苷酸；采用尿嘧啶特异性切除试剂识别并切除所述扩增片段DNA中含有所述脱氧尿嘧啶核苷酸的特定单链末端，得到粘性片段DNA；其中，所述粘性片段DNA的3'端形成粘性单链末端；将各个所述粘性片段DNA混合并进行退火处理，使相邻所述粘性片段DNA的所述粘性单链末端通过氢键结合，得到混合片段DNA；将所述混合片段DNA转化到宿主细胞中，通过所述宿主细胞的自然修复机制使相邻的所述粘性片段DNA通过磷酸二酯键结合，得到大片段DNA。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 涌源合生科技(深圳)有限公司 一种大片段DNA的合成方法
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