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申请/专利权人:江苏百英生物科技有限公司
摘要:本发明属于生物医药领域,具体涉及一种能捕获包含人IgG1‑CH1结构域的纳米抗体,及利用所述纳米抗体对IgG1抗体、Fab或Fab’2进行分离纯化的方法。因VHH是单结构域抗体非常稳定,预期与细菌表面蛋白如蛋白A和蛋白G相比免疫原性非常低,且不依赖于IgG‑Fc结构域捕获抗体,能有效解决轻链掉落的问题,该抗体能够以高亲和力特异性识别IgG1‑CH1结构域。以本发明所述抗人IgG1‑CH1结构域纳米抗体为配体的亲和层析介质可以实现对IgG1以及其Fab或Fab’2片段的纯化,具有非常广阔的应用前景。
主权项:1.一种纯化IgG1、Fab或Fab’2片段的纯化方法,其特征在于,所述的纯化方法包括如下步骤:1将抗人IgG1-CH1结构域的纳米抗体与固相NHS活化的琼脂糖填料偶联,制备亲和介质,将其填装为预装柱;2利用平衡缓冲液平衡偶联抗人IgG1-CH1VHH蛋白的层析柱,将含有样品溶液进行上样;3利用平衡缓冲液平衡层析柱;4依次使用洗杂缓冲液1和洗杂缓冲液2进行洗杂;5使用洗脱缓冲液进行洗脱,收集获得经纯化的抗体溶液;所述抗人IgG1-CH1结构域的纳米抗体,包含重链可变区,所述重链可变区包含以下的CDR区:氨基酸序列如SEQIDNO:1所示的CDR1,氨基酸序列如SEQIDNO:2所示的CDR2,以及氨基酸序列如SEQIDNO:3所示的CDR3。
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百度查询: 江苏百英生物科技有限公司 一种抗人IgG1-CH1的纳米抗体及通过其纯化IgG1抗体或其片段的方法
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