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申请/专利权人：中国科学院微生物研究所

摘要：本发明公开了重金属吸附及逃逸控制的工程菌株及其构建方法与应用。所述工程菌株是将成套系统导入宿主菌后得到的菌；所述成套系统包括重金属离子调控蛋白、冰核蛋白表面展示的重金属离子吸附蛋白、冰核蛋白表面展示的链霉亲和素结合蛋白和逃逸控制元件；所述逃逸控制元件包括阻遏蛋白PhlF、TetR、LacI与致死蛋白。本发明基于合成生物学技术，提供了在大肠杆菌或恶臭假单胞菌中实现重金属吸附、吸附后微生物富集及逃逸控制等功能于一体的水体重金属吸附及逃逸控制微生物，利用标准化的生物元件实现了复杂、精细和可预测遗传回路的搭建，经过优化设计后能够实现在不同浓度汞离子条件下完成吸附、富集和死亡行为的基因线路。

主权项：1.成套系统，其特征在于：所述成套系统包括汞离子响应元件、汞离子吸附元件、菌体富集元件和逃逸控制元件；所述汞离子响应元件包括启动子1、核糖体结合位点1、由所述启动子1启动表达的汞离子调控蛋白MerR基因；所述汞离子吸附元件包括启动子2、核糖体结合位点2、由所述启动子2启动表达的冰核蛋白表面展示的汞离子吸附蛋白INP-CL5基因；所述菌体富集元件包括启动子2、核糖体结合位点3、由所述启动子2启动表达的冰核蛋白表面展示的链霉亲和素结合蛋白INP-msA2基因；所述逃逸控制元件包括启动子2、核糖体结合位点4、由所述启动子2启动表达的阻遏蛋白PhlF基因，启动子4及由所述启动子4启动表达的阻遏蛋白TetR基因，启动子6及由所述启动子6启动表达的阻遏蛋白LacI基因，启动子7及由所述启动子7启动表达的致死蛋白CcdB基因；所述启动子1的核苷酸序列如下：ctgacagctagctcagtcctaggtataatgctagc；所述启动子2的核苷酸序列如下：catatcgcttgactAcgtacatgagtacggaagtaaggttacgctatccaa；所述启动子4的核苷酸序列如下：TTGACAATTAATCATCGGCTCGTATAATG；所述启动子6的核苷酸序列如下：GCGCAAAACCTTTCGCGGTATGGCATGATAGCGCC；所述启动子7的核苷酸序列如下：tccctatcagtgatagagattgacatccctatcagtgatagagatactgagcacATGACCTTAACGATACGGTACGTTTCGTATCATgACCTTAACGATACGGTACGTTTCGTATCATA；所述核糖体结合位点1的核苷酸序列如下：tactagagtcacacaggaaagtactag；所述核糖体结合位点2的核苷酸序列如下：tactagagaaagaggagaaatactag；所述核糖体结合位点3的核苷酸序列如下：tactagagAAAGAGGAGAAAGGTACC；所述核糖体结合位点4的核苷酸序列如下：tactagaaagaatagtaatactag；所述汞离子调控蛋白MerR基因的核苷酸序列如序列15第2264-2698位所示；所述冰核蛋白表面展示的汞离子吸附蛋白INP-CL5基因的核苷酸序列如序列17第653-1213位所示；所述冰核蛋白表面展示的链霉亲和素结合蛋白INP-msA2基因的核苷酸序列如序列17第1240-2550位所示；所述阻遏蛋白LacI基因的核苷酸序列如序列9第7-1089位所示；所述阻遏蛋白PhlF基因的核苷酸序列如序列17第24-626位所示；所述阻遏蛋白TetR基因的核苷酸序列如序列9第1371-1994位所示；所述致死蛋白CcdB基因的核苷酸序列如序列6第63-368位所示。

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百度查询： 中国科学院微生物研究所 一种重金属吸附与逃逸控制工程菌株及其构建方法与应用