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申请/专利权人:深圳华酶生物科技有限公司
摘要:本发明公开了一种多酶体系一锅催化胞苷合成胞磷胆碱钠的方法,酶体系为构建的重组大肠杆菌工程菌pET28a‑UCK‑BL21DE3、pET28a‑PPK‑BL21DE3、pET28a‑CMK‑BL21DE3、pET28a‑NDK‑BL21DE3、pET28a‑CCT‑BL21DE3和pET28a‑CKI‑BL21DE3通过发酵培养,诱导表达相应的重组酶胞苷‑尿苷激酶UCK、多聚磷酸酶PPK、胞苷酸激酶CMK、核苷二磷酸激酶NDK、磷酸胆碱胞苷酰转移酶CCT和胆碱激酶CKI的混合酶体系;通过混合酶体系水相一锅催化胞苷合成胞磷胆碱钠;本发明的方法,提供了一种反应步骤简单、收率高、成本低、环保且安全的制备胞磷胆碱钠的方法。
主权项:1.一种多酶体系一锅催化胞苷合成胞磷胆碱钠的方法,其特征在于:包括多酶体系为构建的重组大肠杆菌工程菌所制备的重组酶的混合酶;构建的所述重组大肠杆菌工程菌包括pET28a-UCK-BL21DE3、pET28a-PPK-BL21DE3、pET28a-CMK-BL21DE3、pET28a-NDK-BL21DE3、pET28a-CCT-BL21DE3和pET28a-CKI-BL21DE3;对应制备的重组酶分别为胞苷-尿苷激酶UCK、多聚磷酸酶PPK、胞苷酸激酶CMK、核苷二磷酸激酶NDK、磷酸胆碱胞苷酰转移酶CCT和胆碱激酶CKI。
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