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一种用于口腔样本幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测的体系及产品 

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申请/专利权人:华东医院;宁波海尔施基因科技股份有限公司

摘要:本发明提供了一种用于口腔样本幽门螺杆菌H.pylori定量和毒力多重基因检测的体系及产品,涉及生物技术领域。本发明体系包括对16SrRNA进行检测的引物,分别对定量分析基因ureC和人类内参β‑globin进行检测的引物以及分别对10种毒力基因进行检测的引物。使用其制成的产品可半定量检测唾液、漱口水和牙菌斑中的幽门螺杆菌载量,可比较分析同一患者不同口腔样本中幽门螺杆菌10种毒力基因的一致性与差异性,可比较分析同一患者口腔样本与胃粘膜样本中幽门螺杆菌10种毒力基因的一致性与差异性。同时因为口腔样本与胃粘膜相比含幽门螺杆菌菌量可能更少,所以本发明体系的灵敏度更高、特异性更好、准确度更高。

主权项:1.一种幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测体系,其特征在于,包括对菌种鉴定基因16SrRNA进行检测的引物,对幽门螺杆菌半定量检测基因ureC进行检测的引物,对内参基因ß-globin进行检测的引物以及分别对毒力基因vacAm2、iceA2、dupA、cagA、iceA1、luxS、vacAm1、vacAs1、oipA和vacAs2进行检测的引物,所述各引物正向引物的5’端均设有正向通用引物序列,所述各引物反向引物的5’端均设有反向通用引物序列;针对16SrRNA基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.1所示,反向引物核苷酸序列如SEQIDNo.2所示;针对vacAm2基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.3所示,反向引物核苷酸序列如SEQIDNo.4所示;针对iceA2基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.5所示,反向引物核苷酸序列如SEQIDNo.6所示;针对dupA基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.7所示,反向引物核苷酸序列如SEQIDNo.8所示;针对cagA基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.9所示,反向引物核苷酸序列如SEQIDNo.10所示;针对iceA1基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.11所示,反向引物核苷酸序列如SEQIDNo.12所示;针对luxS基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.13所示,反向引物核苷酸序列如SEQIDNo.14所示;针对vacAm1基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.15所示,反向引物核苷酸序列如SEQIDNo.16所示;针对vacAs1基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.17所示,反向引物核苷酸序列如SEQIDNo.18所示;针对oipA基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.19所示,反向引物核苷酸序列如SEQIDNo.20所示;针对vacAs2基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.21所示,反向引物核苷酸序列如SEQIDNo.22所示;针对ureC基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.23所示,反向引物核苷酸序列如SEQIDNo.24所示;针对ß-globin基因的正向引物核苷酸序列如SEQIDNo.25所示,以及针对ß-globin基因的反向引物的核苷酸序列如SEQIDNo.26所示;所述针对16SrRNA、ureC、vacAm2、iceA2、iceA1、luxS、vacAs1、oipA和vacAs2基因的正反向引物的浓度为300nM;所述针对dupA、cagA和vacAm1基因的正反向引物的浓度为400nM;所述针对ß-globin基因的正反向引物的浓度为100nM;所述正向通用引物的核苷酸序列如SEQIDNo.27所示;所述反向通用引物的核苷酸序列如SEQIDNo.28所示;所述幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测体系的PCR反应液体系如下表: ;所述幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测体系的PCR运行程序如下表: 。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 华东医院 宁波海尔施基因科技股份有限公司 一种用于口腔样本幽门螺杆菌定量和毒力多重基因检测的体系及产品

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