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细胞器基因组T至S碱基编辑器及其应用方法 

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申请/专利权人:深圳市农业科技促进中心

摘要:本发明涉及基因工程领域,具体公开了细胞器基因组T至S碱基编辑器及其应用方法;本发明建立了一种高编辑效率低脱靶效应的、适用于真核生物细胞器包括叶绿体和线粒体基因组的胸腺嘧啶碱基编辑器系统,实现T‑to‑S即T‑to‑C或T‑to‑G碱基编辑,填补目前真核生物细胞器基因组胸腺嘧啶碱基编辑技术和工具的空白,扩大碱基编辑器的靶向范围,首先利用转运肽和TALE阵列将碱基编辑器引导进入细胞器基因组靶位点,克服目前TBE只能靶向核基因组而不能靶向细胞器基因组的限制;其次利用工程化人尿嘧啶DNA糖基化酶UNG实现T‑to‑S碱基编辑,避免使用活性脱氨酶,从而降低由活性脱氨酶引起的可能脱靶效应。

主权项:1.细胞器基因组T至S碱基编辑器,分为适用真核生物叶绿体基因组的叶绿体胸腺嘧啶碱基编辑器cpTBE和适用真核生物线粒体基因组的线粒体胸腺嘧啶碱基编辑器mtTBE,其特征在于,具体包括:转运肽,所述转运肽用于将TBE引导到相应的细胞器中实现T碱基编辑;DddAE1347A,所述DddAE1347A为DddA全长E1347A突变体,用于瞬时融化双链DNA进而形成瞬时暴露的单链DNA;UNGm,所述UNGm为人尿嘧啶DNA糖基化酶突变体,用于切除T碱基;TALE,所述TALE用于将UNGm和DddAE1347A携带到基因组目标编辑位点。

全文数据:

权利要求:

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