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一种水中鼠伤寒沙门氏菌快速检测方法 

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摘要:本发明属于食品微生物检测技术领域,提供了一种检测鼠伤寒沙门氏菌的生物传感器,包括拱形探针Apt‑T,激活双链A1‑A2,Blocker‑crRNA,发夹H1,发夹H2,报告探针FQ,LbaCas12a(Cpf1)蛋白和含Mg2+溶液。该传感器基于杂交链式反应产生的DNAzyme完成crRNA的释放,利用CRISPRCas12a的反式切割活性进行信号转导,通过三种信号放大模式实现对靶标鼠伤寒沙门氏菌的高灵敏检测。本发明的传感器具有良好的分析性能,并且具有检测速度快、操作简单、检测限低、特异性强、灵敏度高等优点。可以弥补食源性致病菌现有检测方法的缺陷与不足,实现对其快速、准确的定量检测。

主权项:1.一种检测鼠伤寒沙门氏菌的生物传感器,其特征在于,包括拱形探针Apt-T,激活双链A1-A2,Blocker-crRNA,发夹H1,发夹H2,报告探针FQ,LbaCas12a(Cpf1)蛋白和含Mg2+溶液;所述拱形探针Apt-T由核苷酸序列如SEQIDNO:1和2所示的鼠伤寒沙门氏菌的适配体Apt与T链杂交形成;所述激活双链A1-A2由SEQIDNO:3和4所示的A1和A2杂交形成;所述Blocker-crRNA由SEQIDNO:5-7所示的Blocker1、Blocker2与crRNA杂交形成,且Blocker1的第17位为核糖核苷酸,Blocker2的第16位为核糖核苷酸;所述发夹H1和发夹H2的核苷酸序列分别如SEQIDNO:8和9所示;所述报告探针FQ为:FAM-TTATT-BHQ1。

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