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一种同时检测引起中耳炎的3种细菌的多重RT-PCR方法及试剂盒和应用 

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摘要:本发明公开了一种同时检测能够引起中耳炎的3种细菌的多重RT‑PCR方法及试剂盒和应用,该实时荧光定量PCR检测试剂盒包括PCR引物探针,所述PCR引物探针包括分别针对肺炎链球菌、卡他莫拉菌、金黄色葡萄球菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针;其序列分别如SEQIDNO.1~SEQIDNO.9所示,本发明能够检测肺炎链球菌、卡他莫拉菌、金黄色葡萄球菌,具有非常高的灵敏度与特异性。

主权项:1.一种同时检测引起中耳炎的3种细菌的多重RT-PCR检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括用于检测肺炎链球菌、卡他莫拉菌、金黄色葡萄球菌的管1试剂和Tap酶,所述管1试剂包括PCR引物探针缓冲液、病原体引物探针、人DNA内参引物探针;其中,管1试剂内靶标为肺炎链球菌、卡他莫拉菌、金黄色葡萄球菌;肺炎链球菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.1~SEQIDNO.3所示;卡他莫拉菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.4~SEQIDNO.6所示;金黄色葡萄球菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.7~SEQIDNO.9所示;人DNA内参的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.10~SEQIDNO.12所示。

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