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申请/专利权人：河北康腾生物科技有限公司
摘要：本发明涉及细胞培养领域，公开了一种体外NK细胞培养制备方法及其应用，本发明提出的体外NK细胞培养制备方法以HER2为诱导因子，并引入辅助刺激信号，旨在模拟体内天然NK细胞受到的复合信号，增强其活化分化和杀伤活性，IL2121518为活化因子的培养体系，同时联合人工树突状细胞载体和柜蒽啉等新方式，进一步提升NK细胞的扩增效率和持久杀伤能力。单次采血50ml，能有效培养出70‑100亿细胞单位的制剂，大幅提高临床使用的频率和剂量；本发明提出的体外NK细胞培养制备方法得到的NK细胞在细胞数量、细胞表面标志物表达、细胞增殖能力和IFN‑γ分泌量上均有显著提升。
主权项：1.一种体外NK细胞培养制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：收集外周血并分离单个核细胞（PBMC；S2：诱导扩增PBMC中的NK细胞；将分离的PBMC分为两部分，一部分用装载有NK细胞活化配体的人工树突状细胞进行诱导，另一部分用曲妥珠单抗在37℃包被培养瓶中培养1-2小时；将PBMC按比例分别接种到包被好的培养瓶和装载细胞中；加入诱导活化的细胞因子：IL-2、IL-12p70、IL-15、IL-18；自体血清；IL-1β和IL-6；DNA甲基转移酶抑制剂；每2-3天翻倍补充新鲜培养基S3：第7天细胞转袋；将诱导扩增后的细胞转移到新的培养袋中；加入新的细胞因子：IL-2和IL-21；每2天翻倍补充新鲜培养基；S4：第10天后，每2天按1.5倍补充新鲜培养基，加入柜蒽啉诱导持久杀伤活性；S5：收集扩增后的NK细胞制剂。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 河北康腾生物科技有限公司 一种体外NK细胞培养制备方法及其应用
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