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检测HPV高危型的引物组合、试剂盒及方法 

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申请/专利权人:广州万孚生物技术股份有限公司

摘要:本发明公开了一种检测HPV高危型的引物组合、试剂盒和方法,所述引物组合包括:用于检测HPV16、HPV18、HPV31、HPV39、HPV35、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、和或HPV73的引物对。本发明设计了针对HPV高危型亚型检测的引物,并在上游引物和或下游引物的特定位置修饰一个或两个荧光基团,基于不同引物组的扩增子的Tm值的不同,即可实现一管同时对多种高危型HPV亚型的检测,且极大地缩短了目前市面上的熔解曲线技术检测HPV的时间。

主权项:1.一种检测HPV高危型的引物组合,其特征在于,包括:用于检测HPV16的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:1或SEQIDNO:31所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:2所示;所述SEQIDNO:1的第5个和第16个碱基上修饰有荧光基团;所述SEQIDNO:31的第5个碱基上修饰有荧光基团;用于检测HPV18的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:3、SEQIDNO:35或SEQIDNO:36所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:4所示;所述SEQIDNO:3的第13个碱基上修饰有荧光基团;所述下游引物的第18个碱基上修饰有荧光基团;用于检测HPV31的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:5所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:6所示;所述上游引物的第7个和第16个碱基上修饰有荧光基团;用于检测HPV39的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:7所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:8所示;所述上游引物的第17个碱基上修饰有荧光基团;用于检测HPV35的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:9所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:10所示;所述上游引物的第12个碱基上修饰有荧光基团;用于检测HPV45的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:11所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:12所示;所述上游引物的第15个碱基上修饰有荧光基团;用于检测HPV51的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:13所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:14所示;所述上游引物的第15个碱基上修饰有荧光基团;所述下游引物的第16个碱基上修饰有荧光基团;用于检测HPV52的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:15所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:16所示;所述上游引物的第17个碱基上修饰有荧光基团;用于检测HPV56的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:17所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:18所示;所述下游引物的第16个碱基上修饰有荧光基团;用于检测HPV58的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:19所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:20所示;所述上游引物的第16个碱基上修饰有荧光基团;用于检测HPV59的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:21所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:22所示;所述上游引物的5′端和第17个碱基上修饰有荧光基团;用于检测HPV66的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:23或SEQIDNO:38所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:24所示;所述下游引物的5′端和第16个碱基上修饰有荧光基团;用于检测HPV68的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:25所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:26所示;所述上游引物的5′端和第16个碱基上修饰有荧光基团;和或,用于检测HPV73的上游引物和下游引物,所述上游引物的序列如SEQIDNO:27所示,所述下游引物的序列如SEQIDNO:28所示,所述上游引物的5′端和第17个碱基上修饰有荧光基团。

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