龙图腾网&IPTOP
- 微信扫码登录
- 账号密码登录
- 短信登录/注册
买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！
申请/专利权人：四川农业大学
摘要：本发明涉及细胞分离培养技术领域，具体涉及一种家禽胫骨软骨原代细胞的分离及培养方法。本发明以0.25%的胰蛋白酶和0.1%的Ⅱ型胶原酶为消化液，完全培养基为基础液进行软骨细胞培养。其中，0.1%的Ⅱ型胶原酶配比为：100mgⅡ型胶原酶：100mLDMEMF‑12；50mL完全培养基包含以下成分：5mL胎牛血清（FBS）、0.5mL青链霉素和44.5mLDMEMF‑12。本发明通过对消化酶的选择、消化方式和时间的优化，使软骨组织最大化产出涨势良好且活力稳定的软骨细胞。
主权项：1.一种家禽胫骨软骨原代细胞的分离及培养方法，其特征在于包括以下步骤：（1）按照软骨组织碎片：0.25%胰蛋白酶=1:3～4的体积比加入0.25%胰蛋白酶，随后在37℃水浴锅中消化20min，期间轻摇2次离心管；（2）加入等体积完全培养基终止消化，经1500rmin，离心5min，弃上清；加入1:3～4体积比的0.1%II型胶原酶，巴氏吸管旋转搅散，随后置于37℃水浴锅中消化，期间轻摇几次离心管并避免紫外线照射；（3）消化悬浊液以800rmin条件下离心5min，取上清经75µm细胞过滤筛过滤两次；同时向离心管中残留的软骨组织中加入2～4倍体积0.1%II型胶原酶继续消化，其余操作同（2）；（4）所得滤液以1500rmin离心10min，弃上清，加入少量完全培养基重悬软骨细胞后，在2000rmin条件下离心5min，随后加入适量完全培养基并用巴氏吸管轻轻吹打250-300下使细胞均匀重悬；（5）将软骨细胞接种于细胞培养瓶中，在35～38℃、4～6％CO2、饱和湿度95%的培养箱中进行培养，再按照步骤（1）-（4）处理，置于上述培养箱中培养即可。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 四川农业大学 家禽胫骨软骨原代细胞的分离及培养方法
免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。
主营中国专利交易买卖与专利转让许可,高校科技成果推广与科技成果转化,知识产权运营管理与平台开发,科技人才专家库与科技猎头等科技服务
开放平台
担保交易
惠及多方
会员特惠
专属平台
适合多方
数据共享
功能齐全
皖公网安备 34010402703815号