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申请/专利权人：天津大学
摘要：本发明公开了高产黄素腺嘌呤二核苷酸的大肠杆菌菌株及构建方法与应用，构建方法为：1制备黄素腺嘌呤二核苷酸合成酶突变体CgFMNATI162FD181S；构建表达突变体的编码基因；2将核黄素激酶基因FMN1和步骤1获得的基因在质粒p20C中组合过表达，得到重组质粒pCN2；3将pCN2导入菌株LS52T中，获得菌株DF09；4在菌株DF09染色体上敲除基因ushA，并整合基因purA，得到高产黄素腺嘌呤二核苷酸的大肠杆菌菌株DF12。本发明在摇瓶有氧条件下以葡萄糖为底物发酵，36h时生产了900.6mgL的黄素腺嘌呤二核苷酸，得率为93.04mgg葡萄糖。
主权项：1.高产黄素腺嘌呤二核苷酸的大肠杆菌菌株的构建方法，其特征是包括如下步骤：1对光滑假丝酵母来源的黄素腺嘌呤二核苷酸合成酶CgFMNAT突变改造，得到所述合成酶的突变体CgFMNATI162FD181S；构建表达CgFMNATI162FD181S的编码基因；2将核黄素激酶基因FMN1和步骤1获得的基因在质粒p20C中组合过表达，得到重组质粒pCN2；3将重组质粒pCN2导入高产核黄素的菌株LS52T中，获得菌株DF09；4在菌株DF09染色体上敲除编码5’-核苷酸酶的基因ushA，并整合编码腺苷酸基琥珀酸合成酶的基因purA，得到高产黄素腺嘌呤二核苷酸的大肠杆菌菌株DF12。
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权利要求：
百度查询： 天津大学 高产黄素腺嘌呤二核苷酸的大肠杆菌菌株及构建方法与应用
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