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一种提高积雪草酸C28-O葡萄糖糖基化修饰的方法 

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申请/专利权人:江南大学

摘要:本发明公开了一种提高积雪草酸C28‑O葡萄糖糖基化修饰的方法,属于酶工程技术领域。本发明筛选了催化效率提高的UDP‑葡萄糖基转移酶CaUGT73AD1,通过更换启动子及融合促溶标签,提高了CaUGT73AD1的可溶性表达水平和积雪草酸的转化效率;进一步通过对CaUGT73AD1表面电荷优化,获得了CaUGT73AD1突变体。在大肠杆菌中完成上述优化可使葡萄糖糖基化修饰积雪草酸生成积雪草酸单葡萄糖苷的转化率提高至67.6%。进一步将上述优化用于双质粒表达的酶级联催化积雪草酸合成积雪草苷的系统中,可使积雪草苷产量增加3.37倍。

主权项:1.UDP-葡萄糖基转移酶突变体,其特征在于,是在亲本的基础上,具有如下一个或多个突变:N4D、H70E、N205D、K242E、N481E;所述亲本的氨基酸序列与Genbank登录号:ALD84259.1所示序列具有90%以上的同一性。

全文数据:

权利要求:

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