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申请/专利权人：广西中医药大学百年乐制药有限公司

摘要：本发明涉及中药质量检测技术领域，特别涉及一种古羊藤高效液相色谱法指纹图谱构建方法及其应用，本发明通过收集于广西不同产地区的古羊藤样品形成集合，以原儿茶酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C为研究指标，进行古羊藤特征图谱的建立方法和测定方法，为药材级古羊藤的质量控制提供了参考和依据，建立的指纹图谱对10个不同地域的古羊藤样品进行检测，得到相同位置的色谱峰的相对保留时间的RSD均小于2％，古羊藤的相似度值≥0.90，采用本申请的方法构建的指纹图谱对古羊藤样品进行检测，能有效区分药材级和非药材级古羊藤，经过抑菌实验发现：药材级古羊藤具有良好的抑菌效果。

主权项：1.一种古羊藤高效液相色谱法指纹图谱构建方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1对照品溶液的制备：称取原儿茶酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C为对照品，用甲醇溶解做为对照品储备液，各取对照品储备液适量置于同一容量瓶中混合，加甲醇定容，摇匀，即得；2液相色谱条件的确定：色谱柱：AcclaimTM120C18:120A4.6mmx250mm，5μm色谱柱；以乙腈为流动相A，以体积百分数为0.2％甲酸溶液为流动相B，梯度洗脱，流速为1.0mLmin，柱温30℃，检测波长300nm，进样体积10μL；3指纹图谱：按照步骤2的色谱条件对古羊藤对照品和供试品溶液进行分析比较，得到由样品共有特征峰构成的荆防制剂标准指纹图谱；所述梯度洗脱条件为：0min：流动相A的体积百分含量为8％、流动相B乙腈的体积百分含量为92％；18min：流动相A的体积百分含量为8％、流动相B乙腈的体积百分含量为92％；20min：流动相A的体积百分含量为9％、流动相B乙腈的体积百分含量为91％；24min：流动相A的体积百分含量为9％、流动相B乙腈的体积百分含量为91％；30min：流动相A的体积百分含量为12％、流动相B乙腈的体积百分含量为88％；35min：流动相A的体积百分含量为14％、流动相B乙腈的体积百分含量为86％；55min：流动相A的体积百分含量为14％、流动相B乙腈的体积百分含量为86％；60min：流动相A的体积百分含量为17％、流动相B乙腈的体积百分含量为83％；72min：流动相A的体积百分含量为17％、流动相B乙腈的体积百分含量为83％；85min：流动相A的体积百分含量为22％、流动相B乙腈的体积百分含量为78％；110min：流动相A的体积百分含量为22％、流动相B乙腈的体积百分含量为78％；115min：流动相A的体积百分含量为8％、流动相B乙腈的体积百分含量为92％；120min：流动相A的体积百分含量为8％、流动相B乙腈的体积百分含量为92％。

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