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申请/专利权人：广东省大湾区华南理工大学聚集诱导发光高等研究院;广州艾格科技发展有限公司

摘要：本发明公开了检测生长分化因子‑15的聚集诱导发光免疫层析试纸条及其制备方法和应用。所述试纸条包括底板和在底板上依次搭接的样品垫、结合垫、分析膜和吸水垫；所述结合垫上包被有生物素标记的生长分化因子‑15第一抗体和荧光微球标记的生长分化因子‑15第二抗体；所述分析膜上设置有检测线和质控线，所述检测线上包被有链霉亲和素。本发明的试纸条具有灵敏度高检出限为50pgmL、检测范围宽50~30000pgmL、检测快速（8min出结果）等特点，能够定量检测人血清、血浆或全血样本中GDF‑15的含量，有助于早期发现微小心血管损伤患者，为临床治疗提供辅助指导。

主权项：1.检测生长分化因子-15的聚集诱导发光免疫层析试纸条，其特征在于，所述试纸条包括底板和在底板上依次搭接的样品垫、结合垫、分析膜和吸水垫；所述结合垫上包被有生物素标记的生长分化因子-15第一抗体和荧光微球标记的生长分化因子-15第二抗体；所述生长分化因子-15第一抗体和生长分化因子-15第二抗体识别的抗原表位不同；所述分析膜为硝酸纤维素膜，其上设置有检测线和质控线，所述检测线上包被有链霉亲和素；所述结合垫和质控线上还分别包被有质控物及其结合物，所述质控物包括荧光微球标记的DNP-BSA，结合物包括DNP多克隆抗体；所述荧光微球标记的生长分化因子-15第二抗体包括粒径为100±10nm聚集诱导发光微球标记的生长分化因子-15第二抗体和粒径为350±20nm聚集诱导发光微球标记的生长分化因子-15第二抗体；所述荧光微球为AIE荧光微球；所述结合垫的制备包括在结合垫上用标记稀释液进行处理，所述标记稀释液为含质量浓度0.5%甘氨酸、质量浓度1%酪蛋白钠盐、体积浓度4%Tween20、质量浓度20%海藻糖的50mMpH7.5Tris-Hcl缓冲液，还含有体积浓度1%生物素标记的生长分化因子-15第一抗体，体积浓度1%粒径为100±10nmAIE荧光微球标记的生长分化因子-15第二抗体，体积浓度1%粒径为350±20nmAIE荧光微球标记的生长分化因子-15第二抗体和体积浓度0.5%粒径为200±10nmAIE荧光微球标记的DNP-BSA，均匀喷涂两条线，用量为2μLcm；所述生物素包括N-羟基琥珀酰亚胺-生物素；所述检测线上链霉亲和素的包被浓度为2mgmL、用量为1μLcm；所述质控线上DNP多克隆抗体的包被浓度为0.5mgmL、用量为1μLcm；所述样品垫包被有样品垫处理液，所述样品垫处理液为含0.01mgmLRBC抗体、0.15mgmL鼠IgG、质量浓度0.5%酪蛋白钠盐、质量浓度1%S9、质量浓度0.2%EDTA-Na2、质量浓度0.5%PEG20000、质量浓度2%海藻糖的10mMpH7.4的PBS；所述样品垫的制备包括：用所述样品垫处理液处理玻璃纤维膜，用量为0.045mLcm2。

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