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一种D-二聚体AIE荧光免疫层析试剂卡及其应用 

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申请/专利权人:广东省大湾区华南理工大学聚集诱导发光高等研究院;广州艾格科技发展有限公司

摘要:本发明提供了一种D‑二聚体AIE荧光免疫层析试剂卡及其应用,所述试剂卡包括衬底和衬底上依次设置的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸;所述结合垫上含有生物素标记的D‑Dimer抗体1#、AIE荧光微球同时标记的D‑Dimer抗体2#与二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物;所述D‑Dimer抗体1#和D‑Dimer抗体2#识别D‑Dimer抗原的不同表位;所述硝酸纤维素膜上含有包被有链霉亲和素的检测线和包被有二硝基苯酚多克隆抗体的质控线。所述试剂卡具有检测范围宽、灵敏度高、准确度高、检测快速简便等特点,在D‑二聚体定量检测中具有重要的应用价值。

主权项:1.一种D-二聚体AIE荧光免疫层析试剂卡,其特征在于,所述试剂卡包括衬底和衬底上依次设置的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸;所述结合垫上含有生物素标记的D-Dimer抗体1#、AIE荧光微球同时标记的D-Dimer抗体2#与二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物;所述D-Dimer抗体1#和D-Dimer抗体2#识别D-Dimer抗原的不同表位;所述硝酸纤维素膜上含有包被有链霉亲和素的检测线和包被有二硝基苯酚多克隆抗体的质控线;所述样品垫的制备包括:用样品垫处理液处理玻璃纤维膜,所述样品垫处理液为0.03mgmL抗红细胞抗体、0.3mgmL异嗜性抗体阻断剂、0.5%吐温-20、1.0%BSA、1.5%蔗糖、10mM、pH7.4PBS;所述样品垫经样品垫处理液处理后,所述抗红细胞抗体的含量为23.4μgcm2;所述异嗜性抗体阻断剂的含量为234μgcm2;所述结合垫的制备包括:在活化的AIE荧光微球中分别加入D-Dimer抗体2#和二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物进行偶联反应,所述AIE荧光微球、D-Dimer抗体2#与二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物的摩尔比为1:5:3;将同时标记了D-Dimer抗体2#和二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物的AIE荧光微球、生物素标记的D-Dimer抗体1#用微球稀释液稀释;用稀释后的混合液均匀喷涂两条线,稀释后的混合液中生物素标记的D-Dimer抗体1的终浓度为0.033mgmL,同时标记了D-Dimer抗体2#和二硝基苯酚牛血清白蛋白偶联物的AIE荧光微球的终浓度为0.333mgmL,喷涂用量为3μL液量cm结合垫;划线后所述结合垫上AIE荧光微球的含量为2μgcm;生物素标记的D-Dimer抗体1#的含量为0.2μgcm;所述AIE荧光微球粒径为150~280nm;所述检测线上链霉亲和素的含量为1μgcm;所述质控线上二硝基苯酚多克隆抗体的含量为1μgcm。

全文数据:

权利要求:

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