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远端残基改造提高活性和稳定性的腈水解酶突变体 

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申请/专利权人:江南大学

摘要:本发明公开了远端残基改造提高活性和稳定性的腈水解酶突变体,属于酶工程技术领域。本发明通过对腈水解酶Nit6803与底物对接,确定Loop1‑Loop4,并进一步设计步进随机组合突变对Loop区进行随机突变,结合迭代组合突变,得到突变体M1‑M3,比酶活相较于WT均显著提升。进一步将突变体M3与催化口袋优选突变结合,得到突变体M4,其比酶活与热稳定性相较于WT均出现显著提升。本发明提供的远端残基改造策略能有效提高腈水解酶活性和稳定性,并且在其他种类酶性能提升方面也存在广阔前景。

主权项:1.一种腈水解酶,其特征在于,所述腈水解酶以SEQIDNO.1所示的氨基酸序列为出发序列,对出发序列进行了包括以下a~c任一组所示的突变:a第65位缬氨酸V突变为异亮氨酸I以及第66位谷氨酸E突变为苏氨酸T;b第71位甲硫氨酸M突变为甘氨酸G以及第72位甘氨酸G突变为谷氨酸E;c第200位谷氨酰胺Q突变为天冬酰胺N以及第201位异亮氨酸I突变为丝氨酸S。

全文数据:

权利要求:

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