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申请/专利权人：南方海洋科学与工程广东省实验室(广州);汕头大学

摘要：本发明涉及一种半叶马尾藻中国变种亲本同步促熟及幼苗保存方法，亲本同步促熟的方法包括：以栽培筏架将采集的半叶马尾藻中国变种的亲本定植于海面水下，进行藻体栽培促熟，采集同步成熟的雌雄藻株的生殖托共培养于装有过滤海水的水槽中，过滤收集受精卵。幼苗保存方法包括：将收集的受精卵用消毒海水冲洗后培养于带开口的容器中，用透气封口膜封口后置于光照培养箱中，保持温度18±1℃，光照强度30‑50μmolphotonsm‑2s‑1，光周期为12L：12D，消毒海水每5‑10天更换一次。本发明可以省去多次进行野外海区调查采样，还能有效地提高受精卵的采集效率；能有效地促进半叶马尾藻中国变种雌雄亲本同步成熟及幼苗苗种的保存，且操作方便、成本低。

主权项：1.一种半叶马尾藻中国变种亲本同步促熟方法，其特征在于，包括：以栽培筏架将采集的半叶马尾藻中国变种的亲本定植于海面水下，进行藻体栽培促熟，采集同步成熟的雌雄藻株的生殖托共培养于装有过滤海水的水槽中，过滤收集受精卵；包括以下步骤：（1）亲本的采集与清洗：于12月至次年2月的大潮期间落潮时到海区低潮带进行半叶马尾藻中国变种亲本的采集，尽快带回避免损伤及干燥；将采集的半叶马尾藻中国变种亲本在过滤海水中刷洗，并置于过滤海水中暂养；（2）亲本的选取：选取长度为15-70cm、生长状态良好、假根健壮的半叶马尾藻中国变种亲本作为栽培促熟的亲本；（3）定植及同步促熟：将步骤（2）挑选的栽培促熟的亲本的假根夹于苗绳的绳股间，挂于海区筏架，苗绳处于水面下20-40cm，经过70-90天海区栽培，雌雄藻株可同步达到成熟长出生殖托；（4）雌雄藻株鉴别：通过外观形态观察及制作徒手切片于10×10倍光学显微镜下镜检判断雌雄，雄生殖托呈圆柱形、相对细长，徒手切片显微观察其横切面可见生殖托内部有密集的短棒状结构；雌生殖托呈圆柱形、相对粗短、部分末端有小分枝，有时可见卵细胞或受精卵挂托，徒手切片显微观察其横切面可见生殖托内部有卵圆形的卵细胞；（5）受精卵收集：采集栽培筏架上成熟的半叶马尾藻中国变种雌雄亲本按照雄株：雌株=1：1-5共培养于装有过滤海水的水槽中，10-12小时后过滤收集释放于水体中的受精卵；其中受精卵的过滤收集方法为：将水槽中的海水先用80目筛绢滤去脱落的叶片、生殖托及杂质，再用260目筛绢过滤收集水体中的受精卵。

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