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摘要:本发明涉及木棉种子组织培养技术领域,尤其为一种适于木棉组织培养的木棉种子消毒方法,其方法包括如下步骤:准备一个密封性良好的玻璃干燥器,然后对玻璃干燥器进行消毒、清洗、干燥后置于通风橱窗,在玻璃干燥器的底部铺设一层变色硅胶,然后在变色硅胶的上方铺设一层隔离板,隔离板的表面开设有孔洞;本发明方法通过将装有种子的培养皿置于玻璃干燥器中,然后利于次氯酸钠溶液与盐酸溶液反应生成的氯气对木棉种子进行消毒,不仅能够对木棉种子进行有效消毒,而步骤更加简单,便捷,且避免种子与消毒用到的溶液直接接触,可减少对种子的伤害和污染,确保木棉种子的萌发率,同时在消毒结束后对氯气进行吸收无害化处理。
主权项:1.一种适于木棉组织培养的木棉种子消毒方法,其方法包括如下步骤:步骤S1、准备一个密封性良好的玻璃干燥器,然后对玻璃干燥器进行消毒、清洗、干燥后置于通风橱窗,在玻璃干燥器的底部铺设一层变色硅胶,然后在变色硅胶的上方铺设一层隔离板,隔离板的表面开设有孔洞;步骤S2、选取大小一致、颗粒饱满的木棉种子,选取木棉种子的重量在46-50mg,将选取后的种子置于干净且干燥的培养皿中,之后将装有种子的培养皿放入玻璃干燥器中,掀开皿盖;步骤S3、在玻璃干燥器内放入干净且干燥的烧杯,然后先倒入浓度为7-8%的次氯酸钠溶液进入烧杯中,后加入浓度为34-36%的盐酸溶液,次氯酸钠溶液与盐酸溶液反应生成氯气,然后迅速合上干燥器盖子进行密封;步骤S4、反应产生的氯气充斥着整个玻璃干燥器,对培养皿中的木棉种子进行消毒,消毒4-8h后,打开玻璃干燥器的盖子,盖上培养皿盖,迅速取出培养皿放入无菌超净工作台,之后打开玻璃干燥器盖,同时准备装有浓度为0.1molLNaOH溶液的烧杯,在培养皿取走后立即放入,NaOH溶液对玻璃干燥器内残余的氯气进行吸收,进行无害化处理,待3-6h后取出两个烧杯;步骤S5、配制12MS+20gL葡萄糖+8gL卡拉胶,pH为5.8的木棉苗培养基,灭菌后将培养基转移至无菌组培瓶中,并将种子转入组培瓶中,在26-28℃条件下进行暗培养10天、光照培养7天。
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百度查询: 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 中国热带农业科学院海口实验站 一种适于木棉组织培养的木棉种子消毒方法
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