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在多肽的重组生产期间防止二硫键还原 

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申请/专利权人:健泰科生物技术公司

摘要:本发明涉及在多肽的重组生产期间防止二硫键还原。本发明关注用于在含双硫的多肽的重组生产期间防止二硫键还原的方法和手段。具体而言,本发明关注在自重组宿主细胞培养物收获含双硫的多肽包括抗体期间防止二硫键还原。

主权项:1.一种用于防止发酵后加工期间重组宿主细胞中表达的抗体中二硫键还原的方法,其包括在细胞培养过程完成后给重组宿主细胞的收获前或已收获细胞培养液补充硫氧还蛋白抑制剂或鼓入空气,其中重组宿主细胞是真核细胞,其中所述真核细胞是中国仓鼠卵巢细胞,其中重组宿主细胞中表达的抗体是与HER2结合且包含如SEQIDNO:16所示的轻链可变域和如SEQIDNO:17所示的重链可变域的治疗性抗体,且其中硫氧还蛋白抑制剂是:i硫氧还蛋白的直接抑制剂;ii硫氧还蛋白还原酶的特异性抑制剂;iii硫酸铜,以介于5μM和100μM之间的浓度添加;ivG6PD的抑制剂,所述G6PD的抑制剂选自下组:吡哆醛-5’-磷酸、1-氟-2,4-二硝基苯、脱氢表雄酮DHEA和表雄酮EA;v己糖激酶活性的抑制剂,所述己糖激酶活性的抑制剂a是EDTA,以介于10mM和50mM之间的浓度添加;或b选自下组:山梨糖-1-磷酸、多磷酸、6-脱氧-6-氟葡萄糖、2-C-羟基-甲基葡萄糖、木糖和来苏糖;或vi与硫氧还蛋白还原酶特异性结合的抗体。

全文数据:

权利要求:

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