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申请/专利权人：青岛啤酒股份有限公司;上海交通大学

摘要：本发明公开了一种啤酒酵母全细胞利用方法及其产品和应用，涉及生物工程技术领域，该方法包括：预处理、酵母破壁、内溶物上清体系中提取酵母核苷酸、沉淀体系中同时提取葡聚糖和甘露寡糖等酵母多糖产品处理。该方法获得的酵母多糖和酵母核苷酸可作为食品添加剂及呈味物质。本发明应用低共熔溶剂实现将多种酵母多糖和酵母核苷酸产品在一条工艺流程中同时分离提取，利用低共熔溶剂在常温下分级提取酵母细胞壁多糖，减少醇类用量，可降低在工业生产中醇沉分离过程中的危险性；低共熔溶剂体系还可以在流程中多次回收利用，以降低原料成本，弱化环境影响；使用具有生物相容性的天然低共熔溶剂保证最终食品级产品的安全性。

主权项：1.一种啤酒酵母全细胞低共熔溶剂分级提取方法，所述方法包括以下步骤：步骤1、预处理：将回收的啤酒酵母泥依次进行除杂、脱苦和水洗，得到水洗后的酵母泥；步骤2、酵母破壁：将步骤1获得的水洗后的酵母泥，进行细胞破壁，得到细胞悬液；离心所述细胞悬液，得到内溶物上清体系和第一细胞壁沉淀体系；步骤3、从步骤2获得的内溶物上清体系中提取酵母核苷酸；步骤4、从步骤2获得的第一细胞壁沉淀体系中同时提取葡聚糖和甘露寡糖；步骤5、酵母多糖产品处理：将步骤4得到的葡聚糖和甘露寡糖进行冷冻干燥或喷雾干燥至固体，获得酵母多糖成品；所述步骤4还包括所述低共熔溶剂分级提取法；所述低共熔溶剂分级提取法包括以下步骤：步骤4.1所述低共熔溶剂分离所述第一细胞壁沉淀体系：向所述第一细胞壁沉淀体系添加所述低共熔溶剂，得到细胞壁上清体系和第二细胞壁沉淀体系，所述第二细胞壁沉淀体系为酵母β-葡聚糖；步骤4.2反溶剂富集所述甘露寡糖：向步骤4.1中分离的细胞壁上清体系中添加所述反溶剂，得到反溶剂上清体系和第三细胞壁沉淀体系，所述第三细胞壁沉淀体系为所述甘露寡糖；所述方法还包括所述低共熔溶剂体系的回收和重复利用，具体为：将步骤4.2得到的所述反溶剂上清体系进行旋转蒸发或烘干，分离得到回收后的低共熔溶剂，所述回收后的低共熔溶剂可以作为所述低共熔溶剂重复用于所述步骤4.1中，分离所述第一细胞壁沉淀体系；所述步骤4.1中所述低共熔溶剂包括以氯化胆碱为氢键受体的低共熔溶剂，所述低共熔溶剂的提取条件为：摩尔比为1:2的氯化胆碱-甘油或摩尔比为1:2的氯化胆碱-尿素或摩尔比1:1的氯化胆碱-乳酸，含水量20％ww，以1:30gmL料液比加入，常温超声；所述步骤4.2中所述反溶剂的沉淀条件为：以2:3v:v比例在体系中添加反溶剂，在常温下静置；所述反溶剂包括水或乙醇。

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