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申请/专利权人：吉林大学

摘要：本发明公开了一种比率荧光比色适配体传感器及其检测黄曲霉毒素B1的方法，属于纳米技术和分析检测领域。其方法为：本研究利用GO‑Fe3O4的吸附、磁性分离、类过氧化物酶催化等多功能特性，以及适配体与靶标之间的特异性识别，构建一种新型比率荧光比色双模式可视化分析平台灵敏检测AFB1。本发明将CuNPs与AMCA‑aptamer结合实现单一激发下比率荧光输出，提高结果准确性和设计通用性；单链DNA调控GO‑Fe3O4催化能力实现比色模式输出，拓展了GO‑Fe3O4类酶活性的应用；本发明两种模式结果相互验证，进一步改善方法的可靠性和特异性。通过ImageJ软件对双模式下的溶液荧光比色信号进行色度分析，实现可视化定量。该方法操作简单、成本低、可通用，并成功应用于奶粉、小麦粉和花生分析。

主权项：1.一种比率荧光比色适配体传感器及其检测黄曲霉毒素B1的方法，其步骤如下：制备氧化石墨烯-Fe3O4复合材料；具体是将0.2g氧化石墨烯粉末溶于200mL水中，超声处理30min；然后，向氧化石墨烯溶液中加入40mL0.4gFeCl2·4H2O和1.08gFeCl3·6H2O的混合溶液；在70℃的氮气环境下搅拌5min，然后加入20mL25wt.％氨水，在该环境下继续剧烈搅拌45min，完成材料合成；合成好的复合材料氧化石墨烯-Fe3O4在外加磁场下收集，并依次用乙腈和超纯水洗涤六次；最终产物溶于水储存备用，或在60℃下恒温烘干后进行材料表征；基于合成的复合材料，将不同浓度的AFB1和AFB1适配体加入三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液中孵育；加入氧化石墨烯-Fe3O4孵育，外加磁场将混合物分离为上清和沉淀两部分，分别用以进行比率荧光和比色双模式检测；将上清液中加入发夹DNA，孵育20min，然后用3-吗啉丙磺酸缓冲液进行稀释，最后加入抗坏血酸，混匀稳定1min，再加入CuSO4，避光反应10min；反应后，测量溶液的荧光光谱，并在紫外光下拍摄溶液荧光颜色进行色度分析；将沉淀重溶于含有H2O2和3,3',5,5'-四甲基联苯胺的乙酸-乙酸钠缓冲液中，25℃避光孵育10min；然后测量652nm处的吸光度，并在可见光下拍摄溶液比色信号照片进行色度分析。

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