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申请/专利权人：广西科技大学;广西三环高科拉曼芯片技术有限公司

摘要：本发明涉及一种用于检测Tau蛋白的新型SERS‑Apt传感器及其使用方法，构建了Fe3O4@PEIAg纳米颗粒（Nc）作为SERS捕获基底，以DNA杂交指示剂亚甲基蓝（MB）作为SERS探针，成功构建了Tau蛋白的SERS‑Apt传感器。Tau蛋白浓度与本发明制备传感器的SERS信号强度存在良好的线性关系，检测限（LOD）为0.18pgmL。对人血清样本进行加标试验，回收率和相对标准偏差（RSD）分别为80%‑107%和1.4%‑5.7%。该新型传感器具有制备简单、特异性强、检测快速、灵敏等特点，在阿尔兹海默症的早期诊断筛查方面具有一定的应用前景。

主权项：1.一种用于检测Tau蛋白的新型SERS-Apt传感器，其特征在于：该传感器采用以下方法制备：（1）制备Fe3O4@PEIAg磁性SERS基底：①Fe3O4@PEI的制备：将8～12g纳米Fe3O4颗粒分散于10～25mL超纯水中，超声5～15分钟，加入8～12mL5mgmL的PEI溶液，超声25～35分钟后，磁分离并用超纯水洗涤，得到Fe3O4@PEI颗粒悬浮液；②Auseeds的制备：取1mL质量浓度1%的HAuCl4溶液加入到99mL水中，磁力搅拌10～20min后，加入1mL质量浓度1%的Na3Cit溶液，继续搅拌1～5min，再逐滴加入1mL质量浓度0.075%的NaBH4与1mL质量浓度1%的Na3Cit的混合溶液，磁力搅拌25～35min，得到Auseeds；③Fe3O4@PEI-Auseeds的制备：将步骤②制备的带负电荷的胶体金Auseeds加入到步骤①制备的带正电荷的Fe3O4@PEI颗粒悬浮液中，超声25～35分钟，磁分离用超纯水洗涤，得到Fe3O4@PEI-Auseed颗粒，分散在50mL超纯水中备用；④Fe3O4@PEIAgNc的制备：取步骤③制备的10mLFe3O4@PEI-Auseeds加到100mL超纯水中超声5～15min，加100mgPVP和1.5mgAgNO3，超声2～5min，快速加入150μL甲醛和150μL氨水超声反应3～8min后，磁分离后，用超纯水洗涤后，溶于50mLPBS缓冲液中，得到Fe3O4@PEIAgNc悬浊液；（2）SERS-Apt传感器的制备：在50μL的Fe3O4@PEIAgNc悬浊液中，加入5μL50μM的SH-Apt溶液和5μL50μM的cDNA溶液，混合均匀，室温下孵育过夜12-15h，磁分离后用PBS缓冲液洗涤；加入20μL1×10-5molL的MB溶液室温下孵育5～7h，磁分离后用PBS缓冲液洗涤，分散在50μL的PBS缓冲液中，得到Tau蛋白SERS-Apt传感器。

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