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一种基于RPA-CRISPR-Cas12a体系可视化检测阴道毛滴虫的试剂盒及方法 

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申请/专利权人:吉林大学

摘要:本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR‑Cas12a体系可视化检测阴道毛滴虫的试剂盒及方法,所述试剂盒包含一对用于扩增阴道毛滴虫actin基因的特异性RPA引物对、用于CRISPRCas12a反应的crRNA、荧光报告基团、侧向流免疫层析报告基团和Cas1213通用侧流层析试纸条,以及用于CRISPR反应的缓冲液和Cas12a蛋白,用于扩增阴道毛滴虫actin基因的特异性RPA引物对的核苷酸序列如SEQIDNO:11和16所示,用于CRISPRCas12a反应的crRNA互补的DNA的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示;该方法快速、可视,且特异性好,敏感度高,可作为一种临床检测阴道毛滴虫的工具,对设备要求较低,特别适用于大规模人群筛查,为公共卫生机构的监测提供良好的技术手段。

主权项:1.一种基于RPA-CRISPR-Cas12a体系可视化检测阴道毛滴虫的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包含一对用于扩增阴道毛滴虫actin基因的特异性RPA引物对、用于CRISPRCas12a反应的crRNA、荧光报告探针、侧向流免疫层析试纸条报告探针和Cas1213通用侧流层析试纸条,以及用于CRISPR反应的缓冲液和Cas12a蛋白;用于扩增阴道毛滴虫actin基因的特异性RPA引物对的核苷酸序列如SEQIDNO:11和SEQIDNO:16所示,用于CRISPRCas12a反应的crRNA的核苷酸序列如SEQIDNO:5所示;用于CRISPRCas12a反应的报告探针为含有TTATT的单链DNA报告序列;用于荧光检测时,荧光报告探针为5′6-FAM-TTATT-BHQ1-3′,用于侧向流免疫层析检测时,试纸条报告探针为5′6-FAM-TTATT-Biotin-3′。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 吉林大学 一种基于RPA-CRISPR-Cas12a体系可视化检测阴道毛滴虫的试剂盒及方法

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