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检测化脓性链球菌的试剂盒及方法 

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摘要:本发明涉及检测技术领域,尤其涉及一种检测化脓性链球菌的试剂盒及方法,包括:(1)通过MCDA扩增技术扩增GAS的SpeB基因并获得扩增产物;(2)CRISPR‑Cas12a诊断系统在gRNA的引导下结合扩增产物,激发Cas12a蛋白的侧链切割活性,切割ssDNA荧光探针分子,发出荧光信号。本发明实施例的检测试剂盒及方法操作过程简单、快速、扩增效率高、灵敏度高,特异性好。

主权项:1.一种检测化脓性链球菌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:MCDA引物;所述MCDA引物包括置换引物对、交叉引物对、第一扩增引物对、第二扩增引物对和第三扩增引物对;所述置换引物对包括序列如SEQIDNO.1所示的正向置换引物F1和序列如SEQIDNO.2所示的反向置换引物F2;所述交叉引物对包括序列如SEQIDNO.3所示的正向交叉引物CP1和序列如SEQIDNO.4所示的反向交叉引物CP2;所述第一扩增引物对包括序列如SEQIDNO.5所示的第一反向扩增引物D1和序列如SEQIDNO.6所示的第一正向扩增引物D2;所述第二扩增引物对包括序列如SEQIDNO.7所示的第二反向扩增引物C1和序列如SEQIDNO.8所示的第二正向扩增引物C2;所述第三扩增引物对包括序列如SEQIDNO.9所示的第三反向扩增引物R1和序列如SEQIDNO.10所示的第三正向扩增引物R2;gRNA;所述gRNA的序列如SEQIDNO.11所示;Cas12a;和,ssDNA荧光探针;所述ssDNA荧光探针的序列如SEQIDNO.12所示。

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